Monoclonal Mouse

FLEX
Negative Control
Rabbit
Frakcja immunoglobuliny z surowicy królików niepoddawanych immunizacji, absorpcja w
fazie stałej
Ready-to-Use
(Link)
Nr kat. IR600
Przeznaczenie
Do stosowania w diagnostyce in vitro.
Odczynnik FLEX Rabbit Negative Control, Ready-to-Use, (Link) jest przeznaczony do stosowania w
immunohistochemii w aparatach Autostainer Link. Przeciwciała są przeznaczone do diagnostyki in vitro w postaci
odczynników do kontroli ujemnej. Zaleca się stosowanie uniwersalnej kontroli ujemnej (UNC) do weryfikacji
odczynów nieswoistych i wspomagania interpretacji odczynów swoistych w miejscu występowania antygenu.
Opisywane odczynniki mogą być stosowane pomocniczo do identyfikacji komórek, tkanek lub składników
tkankowych, które wykazują nieswoiste wiązanie przeciwciał. W niektórych tkankach, szczególnie w tkankach
nowotworowych lub zmienionych martwiczo, może zachodzić nieswoiste wiązanie przeciwciał. Interpretacja
kliniczna dodatniego lub ujemnego odczynu musi być uzupełniona przez ocenę morfologiczną, wykonanie
odpowiednich prób kontrolnych i interpretowana przez doświadczonego patologa w kontekście historii choroby
pacjenta i innych badań diagnostycznych.
Streszczenie
i informacje ogólne
Odczynnik UNC, Rabbit to frakcja immunoglobuliny otrzymywana z nieimmunizowanej surowicy króliczej. Może
być stosowany w odczynach IHC, w których swoiste rozpoznanie i wiązanie antygenu zachodzi przy udziale
króliczych przeciwciał pierwotnych.
Zobacz dokument Ogólne instrukcje wykonywania odczynów immunohistochemicznych firmy Dako lub
następujące części instrukcji do systemu detekcji IHC: 1) Zasady procedury, 2) Niezbędne materiały
niedostarczone z zestawem, 3) Przechowywanie, 4) Przygotowanie preparatu, 5) Wykonanie odczynu,
6) Kontrola jakości, 7) Rozwiązywanie problemów, 8) Interpretacja wyniku odczynu, 9) Ograniczenia metody.
Dostarczany
odczynnik
Gotowe do użycia przeciwciała królicze do kontroli ujemnej są dostarczane w postaci ciekłej w buforze
zawierającym białko stabilizujące i roztwór NaN3 o stężeniu 0,015 mol/L.
Frakcja immunobloguliny z surowicy królików niepoddawanych immunizacji, absorpcja w fazie stałej
Swoistość
Uniwersalna kontrola ujemna nie wykazuje reakcji z komórkami ludzkimi ani zwierzęcymi w preparatach
tkankowych.
Środki ostrożności
1.
2.
3.
4.
5.
Odczynniki przeznaczone dla przeszkolonych Użytkowników.
Opisywany produkt zawiera silnie toksyczny związek — azydek sodu (NaN3), w czystej postaci. Stężenie
NaN3 występujące w produkcie nie jest klasyfikowane jako niebezpieczne. Jednak w wyniku reakcji NaN3 z
ołowiem lub miedzią, wchodzącymi w skład instalacji kanalizacyjnych, mogą powstawać silnie wybuchowe
azydki metali. Przy usuwaniu resztek odczynnika używać dużych ilości wody do przepłukiwania, aby
uniknąć gromadzenia się azydków w instalacji kanalizacyjnej.
Podobnie jak w przypadku każdego produktu otrzymywanego z materiału biologicznego, należy stosować
odpowiednie procedury postępowania.
Należy stosować właściwe wyposażenie ochronne, zabezpieczające przed kontaktem odczynnika ze skórą
bądź oczami.
Niewykorzystany odczynnik należy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i krajowymi.
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2–8°C. Nie stosować po upływie terminu ważności podanego na opakowaniu.
Jeżeli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niż podane na ulotce dołączanej do opakowania,
Użytkownik powinien je zweryfikować. Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego
produktu. Z tego względu jednocześnie z badaniem próbek pochodzących od pacjentów, należy wykonywać
dodatnie i ujemne próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie można wyjaśnić
różnicami w procedurach laboratoryjnych, gdy podejrzewa się problem z przeciwciałem, należy się skontaktować
z działem wsparcia technicznego firmy Dako.
Przygotowanie próbek
i materiały dodatkowe
wymagane, ale
niedostarczane
Przeciwciała mogą być wykorzystane do znakowania utrwalonych formaliną skrawków zatapianych w parafinie.
Preparaty tkankowe należy pociąć na skrawki o wymiarach 4 µm.
Wymagane jest poddanie preparatów cieplnemu odmaskowaniu antygenu. Optymalne wyniki uzyskuje się w
wyniku wstępnej obróbki tkanek przy użyciu roztworu EnVision FLEX Target Retrieval Solution, High pH (10x)
(Link) (nr kat. K8000/K8004) lub EnVision FLEX, Target Retrieval Solution, Low pH (10x), (Link) (nr kat.
K8001/K8005).
Odparafinowane skrawki: Zaleca się wstępną obróbkę utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie
skrawków tkankowych przy użyciu Dako PT Link (nr kat. PT100/PT101). Szczegółowe instrukcje zawiera
Instrukcja użytkownika aparatu PT Link.
(115601-001)
307510PL_001 s. 1/3
Postępować według procedury wstępnej obróbki tkanek zamieszczonej w ulotce roztworu EnVision FLEX
Target Retrieval Solution, High pH (10x) (Link) (nr kat. K8000/K8004) lub EnVision FLEX, Target Retrieval
Solution, Low pH (10x), (Link) (nr kat. K8001/K8005). Dla aparatów PT Link należy stosować następujące
parametry: Temperatura wstępnego ogrzewania: 65°C; temperatura i czas odmaskowania antygenu: 97°C przez
20 (±1) minut; ochłodzić do 65°C. Przepłukać skrawki rozcieńczonym roztworem o temperaturze pokojowej
EnVision FLEX Wash Buffer (10x) (Link) (nr kat. K8000).
Skrawki zatapiane w parafinie: W celu odmiennego przygotowania próbek zarówno odparafinowanie, jak i
odmaskowanie można wykonać w aparacie PT Link z zastosowaniem zmienionej procedury. Informacje można
znaleźć w Instrukcji użytkownika aparatu PT Link. Po zakończeniu wykonywania odczynu skrawki tkankowe
należy poddać odwodnieniu, oczyszczeniu i nakryć za pomocą środka do trwałego zatapiania.
W trakcie przygotowywania oraz podczas procedury znakowania immunohistochemicznego skrawki nie powinny
wyschnąć. W celu uzyskania lepszego przylegania skrawków do szkiełek podstawowych zaleca się stosowanie
szkiełek Dako Silanized Slides (nr kat. S3003).
Procedura wykonania
odczynu i materiały
dodatkowe
wymagane, ale
niedostarczane
Zalecanym systemem wizualizacji jest EnVision FLEX, High pH, (Link) (nr kat. K8000) lub EnVision FLEX,
Low pH, (Link) (nr kat. K8001) w połączeniu z (lub bez) EnVision FLEX+ Rabbit (LINKER), (Link) (nr kat.
K8009). W oprogramowaniu Autostainer Link wstępnie zaprogramowano etapy odczynu i czasy inkubacji.
Szczegółowe informacje dotyczące wkładania szkiełek mikroskopowych i odczynników przedstawiono w
Instrukcji użytkownika aparatu Autostainer Link. Jeśli protokoły nie są dostępne w używanym systemie
Autostainer, należy skontaktować się z działem wsparcia technicznego firmy Dako. Wszystkie procedury
inkubacji należy również przeprowadzać w temperaturze pokojowej.
Optymalne warunki mogą się zmieniać w zależności od rodzaju materiału oraz sposobu jego przygotowania i
powinny być określone indywidualnie w każdym laboratorium. Aby możliwe było wykonanie oceny przez
patologów z różnym nasileniem odczynu preparatów, należy skontaktować się z działem obsługi/obsługą
techniczną firmy Dako w celu uzyskania informacji dotyczącej zmiany programowania protokołu. Należy upewnić
się, że działanie zmodyfikowanego protokołu jest prawidłowe — w tym celu należy ocenić, czy odczyn jest taki
jak opisany w części „Charakterystyka wydajnościowa”.
Zalecane jest barwienie kontrastowe hematoksyliną przy użyciu EnVision FLEX Hematoxylin, (Link) (nr kat.
K8008). Zaleca się stosowanie bezwodnego, trwałego środka do zatapiania.
Interpretacja odczynu
Opisywany produkt nie powinien wywoływać swoistego odczynu komórkowego, zarówno w tkankach
prawidłowych, jak i patologicznych. Listę testowanych tkanek przedstawiono w dodatku 1. i 2.
Charakterystyka
wydajnościowa
Tkanki prawidłowe:
Nadnercza
Szpik kostny
Mózg
Gruczoł sutkowy
Mięsień sercowy
Móżdżek
Okrężnica
Błona śluzowa
trzonu macicy
Przełyk
Serce
Nerki
Jelito grube
Wątroba
Płuca
Jajniki
Śledziona
Trzustka
Ślinianki przyuszne
Rozmazy krwi obwodowej
Łożysko
Gruczoł krokowy
Jelito cienkie
Żołądek
Skóra
Mięśnie szkieletowe
Jądra
Tarczyca
Migdałki
Tkanki nieprawidłowe:
Mięsak pęcherzykowaty
Gwiaździak
Pęcherz moczowy, rak z komórek nabłonka
dróg moczowych
Rak sutka
Przerzuty raka sutka do węzłów chłonnych
Rak zrazikowy sutka
Rak drobnokomórkowy sutka
Naczyniak
Rakowiak
Rak płaskonabłonkowy szyjki macicy
Mięsak dróg żółciowych
Rak gruczołowy jelita grubego
Desmoplastyczny nowotwór drobnokomórkowy
Rak endometrium
Mięsak podścieliska endometrium
Mięsak nabłonkowaty
Mięsak Ewinga
Śluzowaty chrzęstniakomięsak tkanek miękkich
Guz włóknisty opłucnej
Guz włóknisty z histiocytów
Nerwiak zwojowy
(115601-001)
Wątrobiak
Rak z komórek wątrobowych
Chłoniak Hodgkina
Guz z komórek wysp trzustkowych
Nerki, rak z komórek nabłonka dróg moczowych
Mięśniak gładkokomórkowy
Mięsak gładkokomórkowy
Gruczolak z komórek wątroby
Rak gruczołowy płuc
Rak oskrzelowo-pęcherzykowy płuc
Rak płuca
Rak płaskonabłonkowy płuc
Chłoniak
Chłoniak secum
Czerniak
Międzybłoniak
Rak jajnika
Rak trzustki
Rak gruczołowy gruczołu krokowego
BPH gruczołu krokowego
Rak gruczołu krokowego
307510PL_001 s. 2/3
Rak gruczołowy żołądka
Rak gruczołowy żołądka (przerzuty do jajnika)
Rak żołądka
Guz stromalny przewodu pokarmowego (GIST)
Glejak (potworniak jajnika)
Piśmiennictwo
Rak nerek
Mięśniakomięsak prążkowanokomórkowy
Zwyrodnienie tkanki sprężystej pod
promieni słonecznych
Grasiczak
Rak tarczycy
wpływem
Informacje dodatkowe:
–Nadji M. Immunoperoxidase techniques: I. Facts and artifacts. Amer J Dermatopathol 1986; 8(1):32
–Nadji M and Morales AR. Immunoperoxidase: Part 1. The technique and its pitfalls. Lab Med 1983;
14(12):767
Wydanie 09/07
(115601-001)
307510PL_001 s. 3/3