KRUUSE Borrelia Quick

KRUUSE Borrelia Quick
Reagenty, Materiały, Instrumenty
Szybki test na wykrywanie przeciwciał Borrelia w krwi pełnej, surowicy oraz
w plazmie.
I. Zawartość:
•
5 kasetek testowych z pipetą i podkładką osuszającą
•
5 probówek testowych
•
1 buteleczka 2.5 ml odczynnika buforującego
•
1 instrukcja obsługi
Instrukcja obsługi
KRUUSE Borrelia Quick, Szybki test na wykrywanie przeciwciał Borrelia
w krwi pełnej, surowicy oraz w plazmie.
II. Dodatkowy niezbędny sprzęt
•
Timer
Choroba z Lyme u psów
Choroba z Lyme jest jedną z chorób przenoszonych przez wektory (kleszcze).
Patogen Borrelia burgdorferi jest ruchliwą bakterią Gram-ujemną, spiralnego
kształtu (krętkiem). Na świecie przynajmniej 13 genogatunków należy do
kompleksu Borrelia burgdorferi sensu lato (Bsl). Trzy najważniejsze gatunki
Borrelia są również patogenne dla ludzi. Są to B. burgdorferi sensu stricto
(Bss), B. garinii (Bg) i B. afzellii (Ba). U psów potwierdzono patogenność B.
burgdorferi sensu stricto.
Naturalnym rezerwuarem Borrelii są dzikie zwierzęta. Borrelia jest
przenoszona przez kleszcze z gatunku Ixodes ricinus. Zakażenie nie zawsze
prowadzi do natychmiastowego zachorowania. Do czasu wystąpienia
symptomów klinicznych może upłynąć dłuższy okres czasu (2-5 miesięcy).
Objawy kliniczne choroby u psów często rozwijają się podstępnie i mogą być
nieswoiste, jak apatia, powiększenie węzłów chłonnych i gorączka
przerywana. Możliwym objawem klinicznym jest infekcyjne zapalenie
jednego, lub większej liczby stawów, czasami w połączeniu z naprzemienną
kulawizną.
Sporadycznie
występują
glomerulopatie.
Całkowite
wyeliminowanie patogenów jest trudne, nawet przy efektywnej terapii
antybiotykowej.
Wyjaśnienie procesu przeprowadzania testu
Szybki test KRUUSE Borrelia Quick jest testem immunologicznym typu
Sandwich służącym do profesjonalnych zastosowań weterynaryjnych.
Znakowane koloidalnym złotem kompleksy immunologiczne, dzięki
podciąganiu kapilarnemu, przemieszczają się wraz z płynem wzdłuż
membrany, wiążąc się następnie z nieruchomymi przeciwciałami w obszarze
testowym paska testowego.
Przy dodatnim wyniku testu, tj. w obecności przeciwciał swoistych przeciw
antygenom Borrelii, w obszarze testowym tworzą się skupiska składające się
z antygenów, przeciwciał przeciw antygenom Borrelii, oraz znakowanych
złotem przeciwciał detekcyjnych, tworzące w ten sposób kolorową linię.
Jeżeli w obszarze testowym kolorowa linia się nie pojawia, to wynik testu
jest ujemny. W obydwu przypadkach kolorowa linia jest widoczna w
obszarze kontrolnym. Wskazuje to na poprawność przeprowadzenia testu
KRUUSE Borrelia Quick.
Przechowywanie i Data przydatności
Testy KRUUSE Borrelia Quick muszą być przechowywane w temperaturze
pokojowej (2°C do 30°C).
Kasetka testowa
Pasek testowy znajduje się wewnątrz plastikowej obudowy. Z prawej strony
umieszczone jest oczko wlewu próbki. Pole reakcyjne znajduje się pośrodku
kasetki testowej. W polu reakcyjnym znajduje się obszar testowy i obszar
kontrolny. Oznakowanie obok pola reakcyjnego wskazuje odpowiednio
obydwa te obszary – kontrolny (C) i testowy (T).
OSTRZEŻENIA
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Wyłącznie do użytku weterynaryjnego i profesjonalnego
Do jednorazowego użytku
Użyć kasetkę w przeciągu 10 minut od otwarcia torebki
Należy podać właściwą ilość próbki
Nie podawać roztworu próbki na pole reakcyjne
Unikać reakcji krzyżowych stosując nową probówkę dla każdej próbki
Nie dotykać pola reakcyjnego
Stosować wyłącznie oryginalny bufor, dostarczany wraz z zestawem
Materiał próbki może być zakaźny. Zachować ostrożność przy utylizacji
Nie używać kasetek po upływie daty przydatności
Nie używać testu z uszkodzonym opakowaniem
Po upływie wskazanego czasu odczytu traktować wyniki jako nieważne
Przygotowanie próbki
KRUUSE Borrelia Quick służy do badania krwi pełnej, surowicy, lub osocza.
Ogólne zalecenia odnośnie próbek krwi:




Dla uniknięcia hemolizy oddzielić surowicę, lub osocze z krwi
najszybciej jak jest to możliwe
Krew heparynizowana lub EDTA może być stosowana do oddzielenia
osocza
Stosować wyłącznie próbki czyste, nie zhemolizowane
Stosowanie krwi pełnej może zmniejszyć czułość wyniku testu
Test powinien być wykonany natychmiast po pobraniu próbki. Nie pozostawiać
przez dłuży czas próbek w temperaturze pokojowej. Próbki surowicy, lub
osocza można przechowywać w 2-8° C do 3-ch dni. Dla długoterminowego
przechowywania próbki należy trzymać poniżej -20°C. Próbki krwi pełnej
pobrane przez wkłucie dożylne należy przechowywać w temperaturze 2-8°C,
jeżeli test ma być wykonany w przeciągu 2 dni od pobrania. Nie zamrażać
próbek krwi pełnej.
Przed wykonaniem testu doprowadzić próbki do
temperatury pokojowej.
Próbki zamrożone muszą kompletnie odtajać i przed wykonaniem testu muszą
być dokładnie wymieszane. Próbek nie wolno wielokrotnie zamrażać i
odmrażać. Próbki przeznaczone do wysyłki muszą być pakowane zgodnie z
obowiązującymi przepisami dotyczącymi przewozu czynników etiologicznych.
Oczko wlewu
próbki krwi
Obszar testowy i kontrolny
pola reakcyjnego
Po wprowadzeniu na pasek testowy przeciwciał Borrelii w materiale
testowym, reagują one ze znakowanymi złotem antygenami w podłożu
koniugacyjnym. Płyn przemieszcza się następnie w górę paska dzięki
podciąganiu kapilarnemu. W obszarze linii testowej znakowane złotem
kompleksy immunologiczne Borrelii są przechwytywane przez nieruchome
reagenty przechwytujące i w ten sposób powstaje czerwona linia. Obecność
czerwonej linii w obszarze linii testowej wskazuje na dodatni wynik testu.
Gdy próbka nie zawiera przeciwciał Borrelii, to w obszarze testowym linia
się nie tworzy. Dodatkowo, czerwona linia musi się utworzyć w obszarze
linii kontrolnej, niezależnie od obecności przeciwciał Borrelii w próbce.
Linia kontrolna jest elementem kontroli wewnętrznej i wskazuje, że do paska
testowego doprowadzono poprawną ilość płynu, oraz że nastąpiło poprawne
nasączenie membrany.
labsolutions
Wynik dodatni:
Procedura testowa dla surowicy i osocza
1.
Pobrać próbkę krwi i przygotować próbkę surowicy, lub osocza.
Otworzyć torebkę; wyjąć pipetę i pobrać nią próbkę materiału.
Wprowadzić pipetą do oczka wlewu próbki jedną kroplę surowicy, lub
osocza. Odczekać kilka sekund, aż próbka całkowicie się wchłonie.
2.
Otworzyć bufor i dodać do oczka wlewu 2 krople bufora.
Test jest dodatni, gdy w polu reakcyjnym widoczna jest linia
kontrolna (C) oraz linia testowa (T ).
W próbce badanego materiału wykryte zostały przeciwciała
przeciwko antygenom Borrelii.
Pojawienie się bladej linii ciągle świadczy o pozytywnym wyniku
testu.
Nasycenie koloru czerwonego w obszarze testowym zależy od
stężenia przeciwciał Borrelii w materiale próbki.
Jeżeli po upływie 1,5 minuty płyn niezbyt dobrze migruje w górę paska,
dodać do oczka wlewu kolejną kroplę bufora.
UWAGA: KRUUSE Borrelia Quick umożliwia rozróżnienie
przeciwciał produkowanych dzięki szczepionce i po naturalnej
ekspozycji. Test serologiczny na przeciwciała przeciwko Borrelii
należy zawsze interpretować w połączeniu z objawami
klinicznymi
3.
Odczytać wyniki w ciągu 5-10 minut od rozpoczęcia testu.
1.
2.
Wynik ujemny:
Test jest ujemny, gdy widoczna jest jedynie linia kontrolna (C).
Test jest ujemny, gdy jest jedynie linia kontrolna pojawia się w
polu reakcyjnym i nie ma nawet słabo zaznaczonej linii testowej.
W próbce materiału nie wykryto przeciwciał Borrelii.
Procedura testowa dla krwi pełnej
1. Pobrać próbkę krwi. Otworzyć torebkę; wyjąć pipetę i pobrać nią
próbkę materiału. Wprowadzić pipetą do probówki jedną kroplę krwi.
Otworzyć bufor i dodać do probówki 3 krople bufora.
2. Zamknąć probówkę i łagodnie nią wstrząsnąć. Otworzyć ponownie
probówkę i pobrać pipetą materiał próbki. Powoli wprowadzić pipetą
2 krople materiału do oczka wlewu próbki (wprowadzić do oczka
pierwszą kroplę, odczekać kilka sekund, aż się ona wchłonie i wtedy
dodać drugą kroplę).
Jeżeli płyn nie przemieszcza się dobrze w górę paska, po upływie 1,5
minuty dodać do oczka wlewu kolejną kroplę bufora.
.
3.
Odczytać wyniki w ciągu 5-10 minut od rozpoczęcia testu.
1.
Wynik nieważny:
Test jest nieważny, gdy po jego wykonaniu nie widać linii kontrolnej.
Oznacza to, że test mógł nie być poprawnie przeprowadzony, test mógł być
przeterminowany, lub też, że po otwarciu torebki test był zbyt długo
wyeksponowany na działanie zewnętrznego powietrza. Jeżeli to nastąpi,
test należy wykonać ponownie.
UWAGA: Wynik testu musi być odczytany w przeciągu 10 minut od
rozpoczęcia testu. Po tym czasie test, oraz wyniki testu należy traktować
jako nieważne.
Uwagi: Wynik testu należy zawsze oceniać łącznie z odpowiedzią
anamnestyczną i w kontekście klinicznym. Wyniki testów uzyskane z próbek
krwi pełnej i nie korelujące z obrazem klinicznym, należy powtórzyć z
próbką osocza, lub surowicy, gdyż test z krwi pełnej może zmniejszać czułość
wyniku testu.
Utylizacja
Zalecana jest bezpieczna utylizacja. Materiał próbek oraz kasetki
powinny zostać zebrane do szczelnego plastikowego woreczka.
2.
Charakterystyka sprawności testu
KRUUSE Borrelia
Quick
Ocena testu
Wynik testu można odczytać 5-10 minut od jego rozpoczęcia.
IgG ELISA, IgM ELISA, Immunoblot
Czułość
Przeciwciała Borrelii
Uwaga: Wykrycie przeciwciał w materiale próbki nie jest możliwe
przed upływem 3-4 tygodni od zakażenia.
Specyficzność
95,83 %
94,12 %
Literatura
1)
R. K. Straubinger, N. Pantchev (2010): „Die Lyme-Borelliose-Impfung beim
Hund-kontrovers diskutiert“, Kleintier Konkret, Enke Verlag, Stuttgart, 5:8-11.
2) H. J. Selbitz, U. Tryen, P.V. Weigand (2010): „Medizinische Mikrobiologie,
Infektions- und Seuchenlehre“, 9. Aufl. Enke Verlag, Stuttgart.
3) Gary P. Worms and Ira Schwartz (2009): “Antibiotica Treatment of animals
infected with Borrelia burgdorferi”, Clinical microbiology reviews, July 2009,
387-395.
Stosowane symbole
Używać tylko jeden
raz
labsolutions
∑
www.kruuse.com
Dokładnie zapoznać się z
instrukcją obsługi
Zawartość
+30°C
Temperatura przechowywania
+4°C
Numer partii
Data przydatności