Orchid ImmunoStrip Test

1
CymMV & ORSV
test serologiczny
Orchid ImmunoStrip
Test pozwala na szybką i łatwą identyfikację w warunkach polowych dwóch najbardziej
znanych wirusów znalezionych w orchidei: CymMV (ang. Cymbidium mosaic virus) oraz ORSV
(ang. Odontoglossum ringspot virus). Test paskowy ImmunoStrip jest powszechnie
stosowany w laboratoriach hodowli tkankowych, wśród hodowców oraz hobbystów jako
szybki i niezawodny polowy test diagnostyczny.
Zakres detekcji testu Orchid ImmunoStrip został niedawno poszerzony o azjatycki
szczep wirusa CymMV, niewykrywany przez inne testy dostępne na rynku. Co więcej
ponowna optymalizacja testu i jego nowy format umożliwia skrócenie czasu reakcji, co
w rezultacie pozwala na odczytanie wyniku testu już po 5 minutach.
Wykonanie testu nie wymaga żadnych urządzeń analitycznych.
Objawy zakażenia
Objawy zakażenia wywoływane przez wirusy CymMV i ORSV są zmienne. Mogą
różnić się z zależności od genotypu rośliny (rodzaju, gatunku, odmiany), czynników
środowiskowych (temperatury, wilgotności), sposobu prowadzenia roślin (poziom
odżywienia, czynniki stresowe itp.) oraz szczepu i izolatu wirusa. Zdarza się, że zainfekowane
rośliny przechodzą chorobę bezobjawowo, jednak obserwuje się obniżenie wigoru roślin.
Na liściach większości roślin z rodzaju orchidei pojawiają się nieregularne
chlorotyczne lub martwicze zmiany o różnych rozmiarach oraz zmiany w postaci żółtych
pasów. U niektórych mieszańców obserwuje się zmiany w postaci żółtych do czerwonych
kręgów z lub bez nekrotycznym punktem w środku. U gatunku Laelia zakażenie zwykle
objawia się fioletowymi plamami na liściach. Objawem u Cymbidium jest zwykle mozaika ze
zmianami martwiczymi. Z kolei u Phalaenopsis zdarza się obserwować zawijanie liści ku
dołowi. Objawy na kwiatach u Cattleya oraz Phalaenopsis to zwykle martwica lub podział
koloru kwiatu (różnice w kolorze płatków). Kwiaty Cymbidium rzadko dają objawy
chorobowe.
Sposoby rozprzestrzeniania
Rozprzestrzenianie wirusów CymMV oraz ORSV jest generowane wyłącznie przez
człowieka, podczas obsługi i dzielenia orchidei. Dotychczas nie zaobserwowano
rozprzestrzeniania wirusów przez owady lub nasiona. W związku z tym wszystkie narzędzia
wykorzystywane podczas pracy z roślinami muszą być sterylizowane. Nie ma możliwości
wyleczenia rośliny z zakażenia.
Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 ,
fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com
Copyright Novazym Polska 2008
2
CymMV & ORSV
test serologiczny
Przygotowanie próbki:
Próbka może być przygotowana z liścia, kwiatu lub korzenia rośliny. Fragment tkanki
należy zawiesić w buforze ekstrakcyjnym zawartym w woreczku testowym w stosunku 1:20
w/v, co odpowiada 0,15 g tkanki.
W przypadku braku możliwości zważenia próbki, należy pobrać taką ilość tkanki, która
w przybliżeniu odpowiada wielkości orła na monecie 1 zł.
W woreczku znajduje się 3 mL buforu ekstrakcyjnego SEB1, a do niego należy podać
0,15 g tkanki liścia, pąka kwiatowego lub korzenia, albo 0,03 g rozwiniętego kwiatu.
Typ tkanki
Liść
Kwiat (pąk)
Korzeń
Kwiatostan
Rozcieńczenie próbki
(masa tkanki w gramach : objętość buforu w mL)
1:20
1:20
1:20
1:100
Uwaga: Nie należy stosować większych próbek. Przy pobieraniu każdej próbki należy używać
nowego jednorazowego skalpela lub innego sterylnego narzędzia.
Wykonanie testu :
1. Ostrożnie odciąć górną część woreczka z buforem ekstrakcyjnym.
2. Umieścić próbkę w woreczku, a następnie rozcierać tak, aby jak najlepiej zmiażdżyć
tkankę.
Uwaga: Jeden woreczek umożliwia zbadanie tylko jednej próbki.
3. W woreczku z roztartą próbą umieścić pionowo pasek testowy, tak, aby połowa
zielonej końcówki była zanurzona w roztworze. Pasek powinien pozostać w woreczku
przez 30 min.
4. Odczytać wynik po 30 min inkubacji paska w roztworze z próbą.
Uwaga! Wynik może być widoczny już po 5 minutach. Jedynie większe rozcieńczenia
próbki mogą wymagać 30-minutowej inkubacji.
Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 ,
fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com
Copyright Novazym Polska 2008
3
CymMV & ORSV
test serologiczny
Interpretacja wyników:
W przypadku poprawnie wykonanego testu musi pojawić się linia kontrolna.
Pozytywny wynik testu: widoczne dwie/trzy linie - linia kontrolna (wyżej) i linia testowa
(poniżej), obie w kolorze od czerwonego do purpurowego.
Wynik negatywny testu: widoczna jedynie linia kontrolna.
UWAGA! Jeżeli widoczna jest tylko linia/e testowa/e a brak jest linii kontrolnej należy test
powtórzyć. Należy unikać bocznego przepływu buforu przez pasek testowy. Pasek należy
zanurzyć w buforze do linii kontrolnej wskazywanej przez strzałki na pasku testowym.
Przechowywanie: Testy należy przechowywać w suchym miejscu w temp +4 °C
Data ważności:
Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 ,
fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com
Copyright Novazym Polska 2008