QUANTA LiteTM dsDNA

QUANTA Lite® GBM Calibrator Set
508744
Tylko na eksport. Nie na sprzedaż w Stanach Zjednoczonych.
Przeznaczenie
Zestaw kalibratorów QUANTA Lite® GBM jest przeznaczony do stosowania w połączeniu z testem QUANTA Lite® GBM
ELISA. Dodatkowe instrukcje można znaleźć w broszurze informacyjnej testu QUANTA Lite® GBM ELISA.
Odczynniki
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Kalibrator GBM ELISA A, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
Kalibrator GBM ELISA B, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
Kalibrator GBM ELISA C, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
Kalibrator GBM ELISA D, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
Kalibrator GBM ELISA E, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
Kontrola pozytywna GBM, 1 fiolka buforu zawierającego
przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej
Wymagane materiały nie dołączone do zestawu
Zestaw QUANTA Lite® GBM ELISA
Mikropipety na 5, 100, 200–300 i 500 µl
Jednorazowe końcówki mikropipet
Probówki do roztworów próbek pochodzących od pacjenta, 4 ml objętości
Woda destylowana lub dejonizowana
Naczynie o objętości 1 l do rozcieńczonego koncentratu HRP do płukania
Czytnik płytek z mikrodołkami umożliwiający pomiar gęstości optycznej przy 450 nm (i przy 620 nm dla odczytów przy
dwóch długościach fali)
Sposób przygotowania
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Przygotowanie krzywej wzorcowej: W celu wykreślenia 5-punktowej krzywej wzorcowej, dla uzyskania punktów
A-E, należy zastosować WSTĘPNIE ROZCIEŃCZONE kalibratory A-E GBM pobrane bezpośrednio z fiolki.
Pięciopunktowa krzywa wzorcowa ma następujące wartości:
Punkt
Jednostki
A
Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM A
150,0
B
Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM B
75,0
C
Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM C
37,5
D
Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM D
18,8 lub 18,75
E
Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM E
9,4 lub 9,375
Dodać do dołków 100 µl każdego z pięciu kalibratorów, rozcieńczone próbki pacjenta, negatywną kontrolę
ELISA oraz pozytywną kontrolę GBM.
UWAGA: Kontrola pozytywna GBM oraz kontrola negatywna ELISA są wstępnie rozcieńczone i gotowe do
użycia. Wartość i dopuszczalny zakres kontroli pozytywnej GBM są nadrukowane na etykiecie fiolki. Jeśli
kontrola nie wypadnie w dopuszczalnym zakresie zgodnym z tym wydrukowanym na etykiecie, należy
powtórzyć serię. Jeśli w przypadku powtórzonego badania kontrola nie mieści się w ustalonym zakresie, należy
skontaktować się z działem pomocy technicznej firmy INOVA. Zalecane jest wykonanie duplikatów wszystkich
próbek.
Przykryć dołki i inkubować przez 30 minut w temperaturze pokojowej na równej powierzchni. Czas inkubacji
rozpoczyna się po dodaniu ostatniej próbki.
Etap płukania: Odessać całkowicie zawartość każdego dołka. Wlać 200–300 µl rozcieńczonego buforu do
płukania do wszystkich dołków, a następnie go odessać. Powtórzyć tę sekwencję jeszcze dwukrotnie, aby
łącznie przeprowadzić trzy płukania. Odwrócić płytkę i postukać w nią na materiale pochłaniającym w celu
usunięcia pozostałości płynu po ostatnim płukaniu. Ważne jest, aby całkowicie opróżnić każdy dołek po każdym
etapie płukania. Zachować tę samą sekwencję odsysania, jak w przypadku dodawania próbki.
Do każdego dołka dodać 100 µl koniugatu IgG. Koniugat powinien być usunięty z butelek z zastosowaniem
standardowych warunków aseptycznych oraz zalecanych technik laboratoryjnych. Pobrać z butelki jedynie
wymaganą do analizy ilość koniugatu. ABY UNIKNĄĆ POTENCJALNEGO ZANIECZYSZCZENIA
BAKTERYJNEGO I/LUB CHEMICZNEGO, NIE WOLNO WLEWAĆ NIEUŻYTEGO KONIUGATU Z
POWROTEM DO BUTELKI. Inkubować dołki przez 30 minut jak w etapie 3.
Etap płukania: Powtórzyć etap 4.
Dodać 100 µl chromogenu TMB do każdego dołka i inkubować w ciemności przez 30 minut w temperaturze
pokojowej.
Do każdego dołka dodać 100 µl roztworu zatrzymującego. Zachować tę samą sekwencję i czas dodawania
roztworu zatrzymującego, jak w przypadku chromogenu TMB. Delikatnie postukać płytkę palcem, aby dokładnie
wymieszać zawartość dołków.
W ciągu jednej godziny od zatrzymania reakcji odczytać absorbancję (gęstość optyczną) każdego dołka przy
długości fali 450 nm. Jeśli wymagane są pomiary bichromatyczne, referencyjną długością fali może być długość
620 nm.
Obliczanie wyników
1.
2.
3.
Ustalić wartość średnią wszystkich zdublowanych odczytów.
Nanieść średnią absorbancję krzywej kalibratora dla badania GBM w odniesieniu do rejestru ich stężeń. Użyć
wykresu krzywej najlepszego dopasowania. Można również użyć wykresu logarytmicznego. Jednostki GBM
przypisane do kalibratorów znajdują się na fiolce kalibratora.
Ustalić nieznane stężenie GBM z osi „X”, odczytując odpowiednią absorbancję na osi „Y”.
1
QUANTA Lite i INOVA Diagnostics, Inc. są zastrzeżonym znakiem handlowym firmy
Copyright 2011. Wszelkie prawa zastrzeżone©
Wyprodukowano przez:
INOVA Diagnostics, Inc.
9900 Old Grove Road
San Diego, CA 92131
Stany Zjednoczone Ameryki
Pomoc techniczna (poza terenem Stanów Zjednoczonych): 00+ 1 858-805-7950
[email protected]
Autoryzowani przedstawiciele na terenie Unii Europejskiej:
Medical Technology Promedt Consulting GmbH
Altenhofstrasse 80
D-66386 St. Ingbert, Niemcy
Tel.: +49-6894-581020
Faks.: +49-6894-581021
www.mt-procons.com
628744POL
Sierpień 2011
Wersja 0
2