QUANTA LiteTM dsDNA
Transkrypt
QUANTA LiteTM dsDNA
QUANTA Lite® GBM Calibrator Set 508744 Tylko na eksport. Nie na sprzedaż w Stanach Zjednoczonych. Przeznaczenie Zestaw kalibratorów QUANTA Lite® GBM jest przeznaczony do stosowania w połączeniu z testem QUANTA Lite® GBM ELISA. Dodatkowe instrukcje można znaleźć w broszurze informacyjnej testu QUANTA Lite® GBM ELISA. Odczynniki 1. 2. 3. 4. 5. 6. Kalibrator GBM ELISA A, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml Kalibrator GBM ELISA B, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml Kalibrator GBM ELISA C, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml Kalibrator GBM ELISA D, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml Kalibrator GBM ELISA E, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml Kontrola pozytywna GBM, 1 fiolka buforu zawierającego przeciwko GBM, wstępnie rozcieńczony, 1,2 ml konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej konserwant i przeciwciała IgG surowicy ludzkiej Wymagane materiały nie dołączone do zestawu Zestaw QUANTA Lite® GBM ELISA Mikropipety na 5, 100, 200–300 i 500 µl Jednorazowe końcówki mikropipet Probówki do roztworów próbek pochodzących od pacjenta, 4 ml objętości Woda destylowana lub dejonizowana Naczynie o objętości 1 l do rozcieńczonego koncentratu HRP do płukania Czytnik płytek z mikrodołkami umożliwiający pomiar gęstości optycznej przy 450 nm (i przy 620 nm dla odczytów przy dwóch długościach fali) Sposób przygotowania 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Przygotowanie krzywej wzorcowej: W celu wykreślenia 5-punktowej krzywej wzorcowej, dla uzyskania punktów A-E, należy zastosować WSTĘPNIE ROZCIEŃCZONE kalibratory A-E GBM pobrane bezpośrednio z fiolki. Pięciopunktowa krzywa wzorcowa ma następujące wartości: Punkt Jednostki A Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM A 150,0 B Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM B 75,0 C Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM C 37,5 D Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM D 18,8 lub 18,75 E Wstępnie rozcieńczony kalibrator GBM E 9,4 lub 9,375 Dodać do dołków 100 µl każdego z pięciu kalibratorów, rozcieńczone próbki pacjenta, negatywną kontrolę ELISA oraz pozytywną kontrolę GBM. UWAGA: Kontrola pozytywna GBM oraz kontrola negatywna ELISA są wstępnie rozcieńczone i gotowe do użycia. Wartość i dopuszczalny zakres kontroli pozytywnej GBM są nadrukowane na etykiecie fiolki. Jeśli kontrola nie wypadnie w dopuszczalnym zakresie zgodnym z tym wydrukowanym na etykiecie, należy powtórzyć serię. Jeśli w przypadku powtórzonego badania kontrola nie mieści się w ustalonym zakresie, należy skontaktować się z działem pomocy technicznej firmy INOVA. Zalecane jest wykonanie duplikatów wszystkich próbek. Przykryć dołki i inkubować przez 30 minut w temperaturze pokojowej na równej powierzchni. Czas inkubacji rozpoczyna się po dodaniu ostatniej próbki. Etap płukania: Odessać całkowicie zawartość każdego dołka. Wlać 200–300 µl rozcieńczonego buforu do płukania do wszystkich dołków, a następnie go odessać. Powtórzyć tę sekwencję jeszcze dwukrotnie, aby łącznie przeprowadzić trzy płukania. Odwrócić płytkę i postukać w nią na materiale pochłaniającym w celu usunięcia pozostałości płynu po ostatnim płukaniu. Ważne jest, aby całkowicie opróżnić każdy dołek po każdym etapie płukania. Zachować tę samą sekwencję odsysania, jak w przypadku dodawania próbki. Do każdego dołka dodać 100 µl koniugatu IgG. Koniugat powinien być usunięty z butelek z zastosowaniem standardowych warunków aseptycznych oraz zalecanych technik laboratoryjnych. Pobrać z butelki jedynie wymaganą do analizy ilość koniugatu. ABY UNIKNĄĆ POTENCJALNEGO ZANIECZYSZCZENIA BAKTERYJNEGO I/LUB CHEMICZNEGO, NIE WOLNO WLEWAĆ NIEUŻYTEGO KONIUGATU Z POWROTEM DO BUTELKI. Inkubować dołki przez 30 minut jak w etapie 3. Etap płukania: Powtórzyć etap 4. Dodać 100 µl chromogenu TMB do każdego dołka i inkubować w ciemności przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Do każdego dołka dodać 100 µl roztworu zatrzymującego. Zachować tę samą sekwencję i czas dodawania roztworu zatrzymującego, jak w przypadku chromogenu TMB. Delikatnie postukać płytkę palcem, aby dokładnie wymieszać zawartość dołków. W ciągu jednej godziny od zatrzymania reakcji odczytać absorbancję (gęstość optyczną) każdego dołka przy długości fali 450 nm. Jeśli wymagane są pomiary bichromatyczne, referencyjną długością fali może być długość 620 nm. Obliczanie wyników 1. 2. 3. Ustalić wartość średnią wszystkich zdublowanych odczytów. Nanieść średnią absorbancję krzywej kalibratora dla badania GBM w odniesieniu do rejestru ich stężeń. Użyć wykresu krzywej najlepszego dopasowania. Można również użyć wykresu logarytmicznego. Jednostki GBM przypisane do kalibratorów znajdują się na fiolce kalibratora. Ustalić nieznane stężenie GBM z osi „X”, odczytując odpowiednią absorbancję na osi „Y”. 1 QUANTA Lite i INOVA Diagnostics, Inc. są zastrzeżonym znakiem handlowym firmy Copyright 2011. Wszelkie prawa zastrzeżone© Wyprodukowano przez: INOVA Diagnostics, Inc. 9900 Old Grove Road San Diego, CA 92131 Stany Zjednoczone Ameryki Pomoc techniczna (poza terenem Stanów Zjednoczonych): 00+ 1 858-805-7950 [email protected] Autoryzowani przedstawiciele na terenie Unii Europejskiej: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D-66386 St. Ingbert, Niemcy Tel.: +49-6894-581020 Faks.: +49-6894-581021 www.mt-procons.com 628744POL Sierpień 2011 Wersja 0 2