Program szkolenia - POLYGEN Sp. z oo

Program szkolenia:
„Wyznaczanie poziomu ekspresji genów metodą Real-Time PCR (ΔΔCt i
Pfaffla) oraz ocena stopnia degradacji RNA metodą elektroforezy kapilarnej”
Dzień
Godzina Temat zajęć
23 października
9.00 Rozpoczęcie – przedstawienie planu kursu
9.15 Wykład 1 - Przygotowanie prób do reakcji RT-qPCR - metody oceny ilości, czystości
oraz stopnia degradacji RNA
10.00 Doświadczenie I – Izolacja RNA w różnych warunkach, spektrofotometryczna ocena
czystości RNA, wyznaczanie stopnia degradacji RNA metodą elektroforezy kapilarnej
12.00 Wykład 2 – podstawy analizy ilościowej w technice Real-Time PCR i metody
wyznaczania wydajności reakcji PCR. Wybór metody analizy danych oraz wybór
systemu detekcji.
13.00 Przerwa na lunch
13.30 Omówienie wyników doświadczenia I - elektroforeza kapilarna i wyniki
spektrofotometryczne
14.00 Doświadczenie II – przygotowanie rekcji odwrotnej transkrypcji
14.45 Wykład 3 – podstawy analizy relatywnej - zasady wyboru genów referencyjnych –
technika geNorm oraz zastosowanie gotowych paneli genów referencyjnych
15.45 Doświadczenie III – wyznaczanie stężenia cDNA
16.00 Zakończenie zajęć
24 października
9.00 Doświadczenie IV – wyznaczanie krzywej standardowej, wydajności reakcji dla genów
badanych i genu referencyjnego
11.00 Wykład 4 – Metody analizy relatywnej - ΔΔCt i metoda Pfaffla – zastosowanie w
analizie poziomu ekspresji genów
12.00 Omówienie wyników Doświadczenia IV - Eksperyment Walidacyjny czyli jaką metodę
stosować do analizy
12.30 Przerwa na lunch
13.00 Doświadczenie V – przygotowanie reakcji qPCR dla genów badanych i genu
referencyjnego / wyznaczenie względnego poziomu ekspresji genów czyli etap
doświadczeń właściwych
14.00 Wykład 5 Jak zbierać dane i publikować zgodnie z MIQE
14.30 Omówienie wyników Doświadczenia VI – zastosowanie metody ΔΔCt i Pfaffla w
praktyce oraz analiza typu „multiplate”
15.00 Analiza wszystkich wyników, podsumowanie i dyskusja
16.00 Zakończenie szkolenia
Szkolenia prowadzone są na aparatach: TOptical Real-Time PCR firmy Biometra, Qsep do elektroforezy kapilarnej firmy Bioptic ,
NanoPhotometr firmy Implen oraz odczynnikach firmy PrimerDesign.
Koszt uczestnictwa obejmuje materiały drukowane (część teoretyczną i praktyczną), lunch, kawę i napoje, certyfikat ukończenia
kursu.
POLYGEN Sp. z o.o., NIP 894-26-71-632, REGON 930232220
Sąd Rejonowy Wrocław-Fabryczna VI Wydział Gospodarczy KRS 0000008031 Rejestru Przedsiębiorców
BZ WBK S.A. 5 O/Wrocław 51 1090 1522 0000 0000 5201 9368
Wysokość kapitału zakładowego 50 600,00 zł