Celem projektu było określenie roli białek bezpośrednio związanych
Transkrypt
Celem projektu było określenie roli białek bezpośrednio związanych
Nr wniosku: 191252, nr raportu: 6663. Kierownik (z rap.): dr Patrycja Magdalena Jurecka Celem projektu było określenie roli białek bezpośrednio związanych z metabolizmem żelaza, ze szczególnym uwzględnieniem mechanizmów obronnych systemu immunologicznego podczas infekcji. W pierwszej kolejności trwały prace nad otrzymaniem sekwencji nukleotydowych receptora transferynowego i ferrytyny, które odgrywają ważną role w homeostazie Fe. Na podstawie otrzymanych sekwencji skonstruowano startery, użyte następnie do badania ekspresji receptora transferynowego, ferrytyny i transferyny. Następnie wybrano dwie grupy karpi, które znacząco różnią się między sobą odpornością na patogeny: linia R3 (podatna na zakażenia) oraz karp sazan (SA) – dzika forma karpia pochodząca z dalekiego wschodu (odporny na patogeny). Zwierzęta poddane zostały ekspozycji na działanie patogenów w ilościach subletalnych, polegających na zakażeniu ich bakterią Aeromonas hydrophila i pasożytem krwi Trypanoplasma borreli. W każdym z eksperymentów pobierano organy (do pomiarów ekspresji genów) i krew aby monitorować parametry immunologiczne (testy serologiczne - pomiar poziomu Fe podczas infekcji). Przeprowadzone badania pokazały istotne różnice w mechanizmach związanych z walką przeciwko patogenom u karpi bardziej podatnych na zakażenia (linia R3) i karpi bardziej odpornych (karp dalekowschodni sazan). U karpi wrażliwych zaobserwowano klasyczny mechanizm uaktywniający się podczas infekcji, który ma na celu zmniejszenie stężenia żelaza we krwi aby uczynić go niedostępnym dla wirusów czy bakterii. U karpia odpornego na zakażenia przebiegał inny proces, który prawdopodobnie skierowany był na transport żelaza do innych organów immunokompetentnych (np. nerka głowowa), które biorą udział w walce przeciwko patogenom. Proces ten okazał się bardziej efektywny, ponieważ karpie sazany wykazały się większą odpornością na zakażenia a proces powrotu do zdrowia był szybszy. W przypadku zakażenia pasożytem krwi T. borreli u sazana zaobserwowano także o wiele niższą śmiertelność w porównaniu do karpi linii R3. Dziki karp sazan ma także kilkukrotnie wyższe stężenie żelaza we krwi w porównaniu do karpia linii R3. Pomimo spadku poziomu Fe podczas infekcji u obu linii, poziom tego pierwiastka u sazana jest na tyle wysoki, że nie powoduje powstania anemii, która także może przyczynić się do osłabienia zwierząt i tym samym spadku odporności. Otrzymane wyniki w istotny sposób pogłębiły wiedzę na temat wpływu zakażenia na homeostazę żelaza u gospodarza. Przeprowadzone eksperymenty uzupełniły wiadomości związane z metabolizmem żelaza u karpia podczas infekcji pasożytniczej i bakteryjnej. Pozwoli to na wykorzystanie genów związanych z metabolizmem żelaza jako markerów w programach selekcyjnych skierowanych na zwiększenie odporności zwierząt.