Monoclonal Mouse Anti-Human Thyroglobulin Klon DAK

Monoclonal Mouse
Anti-Human
Thyroglobulin
Klon DAK-Tg6
Kod M0781
Przeznaczenie
Do uŜytku diagnostycznego in vitro.
Preparat Monoclonal Mouse Anti-Human Thyroglobulin, Clone DAK-Tg6, stanowi preparat monoklonalnego
przeciwciała mysiego przeciw ludzkiej tyroglobulinie, przeznaczony do zastosowania w technikach
immunocytochemicznych. Przeciwciało znakuje tyreoglobulinę w tkance tarczycy i stanowi uŜyteczne narzędzie
słuŜące do identyfikacji dobrze zróŜnicowanych nowotworów tarczycy (1). Identyfikację róŜnicową wspomagają
wyniki uzyskane z panelu przeciwciał. Wyniki powinna interpretować osoba o potwierdzonych kwalifikacjach w
zakresie patologii, w kontekście historii choroby pacjenta oraz wyników innych badań diagnostycznych.
Wprowadzenie
Tyroglobulina (Tg) jest glikoproteiną, której dominującą formą jest homodimer o masie cząsteczkowej 660 kDa. Tg,
prekursor hormonów tarczycy, jest syntetyzowana w tyreocytach i transportowana do przestrzeni wierzchołkowej,
gdzie ulega wydzieleniu do światła pęcherzyków tarczycy, w których przechowywana jest jako główny składnik
koloidu (>95%). Niewielka część Tg ma postać monomeru o masie cząsteczkowej 330 kDa lub tetramerów.
Redukcja lub rozpad cząsteczek Tg o masie cząsteczkowej 660 kDa lub 330 kDa moŜe prowadzić do powstania
mniejszych polipeptydów. Niektóre z nich, w ilościach śladowych występują w koloidzie. Na powierzchni styku
komórek z koloidem mogą zachodzić posttranslacyjne modyfikacje Tg, polegające na łączeniu reszt tyrozylowych z
jodem i prowadzące do powstania reszt hormonu tarczycy w cząsteczce Tg. Uwolnienie hormonu ogólnie wymaga
pobrania Tg z koloidu przez tyreocyty i przeprowadzenia rozkładu proteolitycznego na drodze lizosomalnej (2).
Odczynnik
dostarczony
Monoklonalne przeciwciało mysie dostarczane w formie płynnej, w postaci zawiesiny hodowli komórkowej
dializowanej wobec 0,05 mol/l Tris/HCl, o pH 7,2, i zawierającej 15 mmol/l NaN3.
Klon: DAK-Tg6. Izotyp: IgG1, kappa.
StęŜenie mysich IgG w mg/L: Zob. etykieta na fiolce.
Immunogen
Oczyszczona ludzka tyrogobulina.
Swoistość
W metodzie Western blotting i pośrednim teście ELISA przeciwciało silnie reaguje z tyreoglobuliną.
Środki ostroŜności
1. Do stosowania przez osoby przygotowane zawodowo.
2. Produkt zawiera azydek sodu (NaN3), odczynnik chemiczny silnie toksyczny w czystej postaci. W stęŜeniu
obecnym w produkcie, chociaŜ nie klasyfikowanym jako niebezpieczne, azydek sodu moŜe reagować z elementami
kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, tworząc silnie wybuchowe pochodne lub azydki tych metali. Przy usuwaniu
odpadów przepłukać odpływ duŜą ilością wody, aby uniknąć tworzenia się azydków.
3. Jak w przypadku kaŜdego materiału biologicznego, naleŜy stosować odpowiednie procedury.
Przechowywanie
Przechowywać w ciemności, w temperaturze 2 - 8°C. Nie u Ŝywać po upływie daty waŜności wskazanej na stemplu
na fiolce. Jeśli produkt był przechowywany w warunkach innych, niŜ zalecane, uŜytkownik musi sprawdzić jakość
produktu. Nie występują wyraźne oznaki wskazujące na niestabilność produktu. Z tego względu, jednocześnie z
oznaczaniem próbek badanych naleŜy przeprowadzać dodatnie i ujemne próby kontrolne. W przypadku uzyskiwania
nieoczekiwanych wyników barwienia, których nie moŜna wytłumaczyć zmianami w zakresie stosowanych procedur
laboratoryjnych i podejrzenia, Ŝe wina leŜy po stronie przeciwciała, naleŜy skontaktować się z naszym Serwisem
Technicznym.
Przygotowanie
próbek
Skrawki parafinowe: Przeciwciało moŜna stosować do znakowania osadzonych w parafinie preparatów tkankowych
utrwalonych w formalinie lub środku utrwalającym Bouin (3). Zaleca się wykonanie wstępnej obróbki tkanek z
zastosowaniem proteinazy K lub termicznego odsłaniania epitopów. W przypadku termicznego odsłaniania epitopów
w tkankach utrwalanych formaliną, optymalne wyniki uzyskuje się korzystając z roztworu Dako Target Retrieval
Solution, nr kat. S 1700, Dako Target Retrieval Solution, High pH (dla wysokiego pH), nr kat. S3308, 10 mmol/l
buforu cytrynianowego o pH 6,0, lub 10 mmol/l buforu Tris, 1 mmol/l EDTA o pH 9,0. Podczas obróbki i po
procedurze barwienia immunocytochemicznego skrawki tkanki nie powinny obsychać.
Procedura barwienia
Rozcieńczanie: monoklonalne mysie przeciwciało przeciw ludzkiej tyreoglobulinie, nr kat. M0781, moŜe być
wykorzystywane w rozcieńczeniach w zakresie od 1:100 do 1:200 w przypadku stosowania do utrwalanych w
formalinie, osadzanych w parafinie skrawków ludzkiej tkanki tarczycy i z wykorzystaniem 20-minutowej termicznej
procedury odsłaniania epitopów w roztworze Dako Target Retrieval, nr kat. S1700, oraz 30-minutowej inkubacji w
temperaturze pokojowej z pierwotnym przeciwciałem. Optymalne warunki zaleŜą od rodzaju próbki oraz metody jej
przygotowania. Z tego względu powinny być one określone odrębnie dla kaŜdego laboratorium. Zalecaną kontrolą
ujemną jest Dako Mouse IgG1, nr kat. X0931, rozcieńczona do takiego samego stęŜenia IgG, jakie dotyczy
pierwotnego przeciwciała. Jeśli stabilność rozcieńczonego przeciwciała i kontroli ujemnej nie została określona w
ramach samej procedury barwienia, zaleca się dokonywanie rozcieńczeń tych odczynników bezpośrednio przed ich
uŜyciem, lub ich rozcieńczanie w rozcieńczalniku Dako Antibody Diluent, nr kat. S0809. Jednocześnie z
oznaczaniem próbki pobranej od pacjenta naleŜy wykonywać kontrole dodatnie i ujemne.
(120783-001)
Dako Denmark A/S
M0781/PL/CE/22.04.04 str. 1/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Wizualizacja: Zaleca się stosowanie zestawów Dako LSAB™+/HRP, nr kat. K0679, i Dako EnVision™+/HRP, nr kat.
K4004 i K4006. Procedura wykonania opisana jest w kaŜdym z zestawów.
Charakterystyka
wyników
Komórki znakowane przeciwciałem wykazują wybarwienie ograniczone do światła pęcherzyków tarczycowych oraz
wierzchołkowej powierzchni tyreocytów. W obrębie nowotworów, przeciwciało moŜe takŜe znakować cytoplazmę
tyreocytów, poza zewnątrzkomórkowym znakowaniem koloidu (1).
Normalne tkanki: Przeciwciało znakuje Tg w pęcherzykach tarczycowych oraz na powierzchni wierzchołkowej
tyreocytów.
Tkanki nieprawidłowe: W pierwotnych guzach tarczycy, przeciwciało znakowało 8/8 komórek brodawkowatych, 6/6
onkocytów, 4/7 komórek słabo zróŜnicowanych i 3/4 komórek pęcherzykowatych, a takŜe 6/6 gruczolaków
pęcherzykowatych i 5/6 gruczolaków z komórek Hürthlego. Nie obserwowano znakowania 4/4 przypadków
nowotworów anaplastycznych i 2/2 przypadków raka rdzeniastego. W przypadku przerzutów guza tarczycy,
przeciwciało zapewniło znakowanie 9/9 guzów brodawczkowatych i 1/3 słabo zróŜnicowanych, podczas gdy nie
obserwowano znakowania w 3 przypadkach raka rdzeniastego i jednym raka anaplastycznego (1).
Bibliografia
1.
Bejarano P.A., Nikiforov Y.E., Swenson E.S., Biddinger P.W. Thyroid transcription factor-1, thyroglobulin,
cytokeratin 7, and cytokeratin 20 in thyroid neoplasms. Appl Immunohistochem Mol Morphol 2000; 8:189-94.
2.
Marinò M., McCluskey R.T., Role of thyroglobulin endocytic pathways in the control of thyroid hormone release.
Am J Physiol Cell Physiol 2000; 279:1295-1306.
3.
Pilotti S., Collini P., Del Bo R., Cattoretti G., Pierotti M.A., Rilke F. A novel panel of antibodies that segregates
immunocytochemically poorly differentiated carcinoma from undifferentiated carcinoma of the thyroid gland. Am
J Surg Pathol 1994; 18:1054-64.
Objaśnienie symboli
Numer katalogowy
Temperatura
przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdzić w instrukcji
stosowania
ZuŜyć przed
(120783-001)
Dako Denmark A/S
Producent
M0781/PL/CE/22.04.04 str. 2/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17