obejmuje wykrywanie obecności DNA prątków należących do
Transkrypt
obejmuje wykrywanie obecności DNA prątków należących do
Diagnostyka materiału klinicznego metodą sondy genetycznej Probe Tec ET BD obejmuje wykrywanie Mycobacterium obecności tuberculosis DNA bezpośrednio prątków w należących materiale do kompleksu diagnostycznym metodą sondy genetycznej Probe Tec ET BD oraz wykonanie: - bakterioskopii, - hodowli na podłożach stałych Lowensteina-Jensena, - hodowli na podłożu płynnym w systemie Bactec dla osadu, z którego uzyskano dodatni wynik sondy genetycznej, testów lekowrażliwości dla szczepu uzyskanego z dodatniej hodowli Bactec. - Wyniki metod dodatkowych są wydawane niezwłocznie w miarę ich uzyskiwania. Diagnostyka w systemie BACTEC MGIT 960 TB: - identyfikacja hodowli prątków do jednej z grup: Mycobacterium tuberculosis complex lub MOTT (Mycobacterium Other Than Tuberculosis) testem BD MGIT Tbc Identification Test bezpośrednio z hodowli płynnej – czas oczekiwania na wynik – 15 minut. - lekowrażliwość na podstawowe leki przeciwprątkowe: streptomycyna, izoniazyd, rifampicyna, etambutol, pyrazynamid – czas oczekiwania na wynik 5 - 8 dni. Diagnostyka konwencjonalna: - identyfikacja Mycobacterium tuberculosis: test akumulacji niacyny - czas oczekiwania na wynik – 30 dni - lekowrażliwość na leki podstawowej terapii przeciwprątkowej: streptomycyna, izoniazyd, rifampicyna, etambutol - czas oczekiwania na wynik - 30 dni - lekowrażliwość na leki II-linii: amikacyna, ofloksacyna, etionamid, davercin, kotrimoksazol - czas oczekiwania na wynik - 30 dni Test T-SPOT® TB Zasada działania: Test jest oparty na technice ELISPOT, która pozwala na wychwycenie interferonu gamma na membranie reakcyjnej, bezpośrednio pod komórką, która wydzieliła cytokinę. Zabarwienie cytokiny w reakcji kolorymetrycznej ujawnia miejsce jej wydzielenia (a tym samym położenie i ilość komórek T efektorowych) tworząc na membranie tzw. ”odcisk stopy” po każdej komórce. Na wynik testu nie ma wpływu zawartość surowicy, a zastosowanie antygenów prątka z regionu RD1 eliminuje wpływ szczepień BCG. Wystandaryzowanie liczby komórek użytych do testu pozwala zachować wysoką czułość testu również u osób z obniżoną odpornością. Wykonanie testu rekomendowane jest: - u osób przed planowaną immunosupresją: terapia antagonistami TNFα chorych na RZS lub inne choroby autoimmunologiczne, chemioterapia, przeszczepianie narządów - u osób zakażonych wirusem HIV - u osób z kontaktu z chorym prątkującym – szczególnie dzieci - u osób podejrzewanych o pozapłucną postać gruźlicy (kręgosłup, kości, stawy, CUN) - u innych osób z grup dużego ryzyka rozwoju gruźlicy (więźniowie, pensjonariusze DPS i podopieczni Pomocy Społecznej, bezdomni, pracownicy Ochrony Zdrowia) Czas oczekiwania na wynik: Metody Rodzaj badania Bakterioskopia Konwencjonalna Bactec 24h 24h Hodowla pozytywna 2 - 8 tygodni 3 - 35 dni Hodowla ujemna 8 tygodni 6 tygodni Kontaminacja 1 tydzień 1 tydzień Lekooporność 30 dni 6 dni Sonda genetyczna T-SPOT® TB 24h 2-3 dni 1 dzień (badania od dostarczenia wykonywane w próbki do poniedziałek i laboratorium czwartek) Wyposażenie w aparaturę badawczą i inne urządzenia do badań: komory laminarne BSL z przepływem pionowym klasy II - jednostanowiskowa Safe/Flow i dwustanowiskowa AURA B3 digestorium „TOLLBRAND 1200” komplet aparatury do sondy genetycznej Probe Tec ET Becton Dickinson aparat Bactec 960 TB Becton Dickinson mikroskop fluorescencyjny BH2-OLYMPUS destylatory wody autoklawy: FREDEGARI z elektronicznym monitoringiem procesu steylizacji; SMS pokoje cieplarki wirówki: HERMLE 32-miejscowa, MPW 370 8-miejscowa ścinacz bakteriologiczny zamrażarka niskotemperaturowa (-75 stC) Platinum 500 wagi: analityczna, tensometryczna inkubator do testów biologicznych inkubator CO2