trigl - Roche

04773187001V9.0
TRIGL
Triglicerydy
Informacja o zamówieniach
04657594 190
10759350 190
10759350 360
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
10171743 122
10171735 122
10171778 122
10171760 122
05117003 190
05947626 190
05947626 160
05117216 190
05947774 190
05947774 160
Analizatory, w których można używać
niniejszych zestawów odczynnikowych
cobas c 111
Triglycerides (4 × 50 testów)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL, dla USA)
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precipath U plus (10 x 3 mL)
Precipath U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precinorm U (20 × 5 mL)
Precinorm U (4 × 5 mL)
Precipath U (20 × 5 mL)
Precipath U (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL, dla USA)
PreciControl ClinChem Multi 2 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL, dla USA)
Kod 401
Kod 401
Kod 300
Kod 300
Kod 301
Kod 301
Kod 300
Kod 300
Kod 301
Kod 301
Kod 391
Kod 391
Kod 391
Kod 392
Kod 392
Kod 392
Polski
GPO
Informacja o aplikacjach
TRIGL: ACN 781
3-fosfoglicerol + O2
Zastosowanie
Test in vitro do ilościowego oznaczania triglicerydów w surowicy ludzkiej i
osoczu w systemach cobas c 111.
Podsumowanie1,2,3,4,5,6
Triglicerydy są estrami glicerolu z 3 długołańcuchowymi kwasami
tłuszczowymi. Częściowo syntezowane są w wątrobie a częściowo
przyswajane z pokarmem.
Oznaczenie triglicerydów stosowane jest w rozpoznawaniu i leczeniu
cukrzycy, nerczycy, zastoju żółci, zaburzeń metabolizmu lipidów oraz
licznych schorzeń endokrynologicznych.
Test enzymatyczny do oznaczania triglicerydów opisany przez Eggsteina i
Kreutza wymagał zmydlania wodorotlenkiem potasu. Podejmowano wiele
prób zastąpienia metody zmydlania zasadowego metodą hydrolizy
enzymatycznej z lipazą. Bucolo i David przeprowadzili próby z mieszaniną
lipazy/proteazy. Wahlefeld do hydrolizy zastosował esterazę wątrobową w
połączeniu ze szczególnie efektywną lipazą z Rhizopus arrhizus.
Metoda niniejsza oparta jest na pracach Wahlefelda, który w celu uzyskania
pełnej hydrolizy triglicerydów do glicerolu, zastosował lipazę lipoproteinową
z mikroorganizmów, a następnie utlenianie do fosforanu dihydroksyacetonu
i nadtlenku wodoru. Uzyskany nadtlenek wodoru reaguje z
4‑aminofenazonem i 4‑chlorofenolem przy udziale peroksydazy, tworząc
czerwony związek barwny (reakcja punktu końcowego Trindera).
Intensywność powstałego czerwonego zabarwienia jest wprost
proporcjonalna do stężenia triglicerydów i może być zmierzona
fotometrycznie.
Zasada pomiaru6
Enzymatyczna metoda kolorymetryczna.
LPL
triglicerydy + 3 H2O
glicerol + 3 RCOOH
GK,
glicerol + ATP
3-fosfoglicerol + ADP
MG++
2016-03, V 9.0 Polski
fosforan dihydroksyacetonu + H2O2
peroksydaza
H2O2 + 4-aminofenazon + 4-chlorofenol
4-(p-benzochino-monoimino)-fenazon + 2 H2O + HCl
Odczynniki - roztwory robocze
R1
Bufor PIPES: 50 mmol/L, pH 6.8; Mg2+: 40 mmol/L; cholan
sodu: 0.20 mmol/L; ATP: ≥ 1.4 mmol/L; 4‑aminofenazon:
≥ 0.13 mmol/L; 4‑chlorofenol: 4.7 mmol/L; LPL (Pseudomonas
spec.): ≥ 83 µkat/L; GK (Bacillus stearothermophilus):
≥ 3 µkat/L; GPO (E. coli): ≥ 41 µkat/L; POD (chrzan):
≥ 1.6 µkat/L; konserwant; stabilizatory
Zalecenia i środki ostrożności
Przeznaczone wyłącznie do celów diagnostyki in vitro.
Należy stosować standardowe procedury postępowania z odczynnikami.
Wszelkie odpady należy usuwać zgodnie z lokalnymi przepisami.
Karta charakterystyki produktu dostępna na życzenie.
Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie
Postępowanie z odczynnikami
Gotowy do użycia
Nieodpowiednie pipetowanie odczynnika wynikające z jego spienienia
może być przyczyną uzyskiwania nieprawidłowych wyników. Przed
umieszczeniem odczynnika w analizatorze należy upewnić się, że z jego
powierzchni usunięto pianę.
Przechowywanie i trwałość
W temp. 2‑8 °C:
Do daty ważności na
opakowaniu
Używany i schłodzony w analizatorze:
2 tyg.
Pobieranie i przygotowanie materiału
W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie
przeznaczone do tego probówki lub pojemniki.
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów
biologicznych wymienionych poniżej.
Surowica
Osocze: krew pobrana na Li-heparynę, K3-EDTA.
1/4
04773187001V9.0
TRIGL
Triglicerydy
Ilość materiału do probówek z EDTA należy pobrać zgodnie z zaleceniami
producenta. Mniejsza objętość krwi w probówkach (mniej niż ½ ) może
mieć negatywny wpływ na wynik oznaczenia.
Pacjenci powinni zachować 10 - 14 godziną karencję pokarmową przed
pobraniem krwi. Próbki powinny być pobrane do probówek bez śladu mydła
czy glicerolu.
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania
oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich
producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych
producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych
przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku
stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle
przestrzegać zaleceń ich producenta.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub
obecnością strątów.
Trwałość w surowicy:
10 dni w temp. 4 °C7
a) Rozcieńczenia Izotopowe/Spektrometria Masowa
Kontrola jakości
Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części
"Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni
materiał kontrolny.
Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane
do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde
laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy
wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym
zakresem.
Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi
zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
15 dni w temp. 4 °C9
Współczynniki przeliczeniowe:
mmol/L × 88.5 = mg/dL
3 mies. w temp.
-20 °C8
mg/dL × 0.0113 = mmol/L
kilka lat w temp.
−70 °C8
Uwaga
Jeżeli uwzględniony ma być również wolny glicerol, od stężenia
triglicerydów należy odjąć 0.11 mmol/L (10 mg/dL).8
Niezbędne materiały dodatkowe (niedostarczone w zestawie)
Zob. część "Informacje o odczynnikach"
Ogólne wyposażenie laboratoryjne
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora,
uwzględniając typ aparatu.
Wszelkie zmiany w aplikacji nie zatwierdzone przez firmę Roche nie
podlegają gwarancji i muszą być zdefiniowane przez użytkownika.
Aplikacja dla surowicy i osocza
Definicja testu cobas c 111
Rodzaj pomiaru
Absorbancja
Model kalkulacyjny absorbancji
Punkt końcowy
Kierunek reakcji
Wzrost
Długość fali A/B
512/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
6/21
Jednostka
mmol/L
Rodzaj reakcji
R-S
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik
(H2O)
R
120 µL
Próbka
2 µL
Całkowita objętość
150 µL
28 µL
Kalibracja
Calibrator f.a.s.
Woda dejonizowana używana jest
automatycznie przez analizator jako
kalibrator zerowy.
Tryb kalibracji
Spójność pomiarowa: Metoda standaryzowana wobec metody ID/MSa).
kilka lat w temp. −70 °C8
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach.
Kalibrator
Dla każdej serii oraz zgodnie z
procedurami kontroli jakości
Wyliczenie
Analizator cobas c 111 automatycznie oblicza stężenie oznaczanej
substancji dla każdej próbki.
3 mies. w temp. -20 °C8
Stabilność w osoczu:
Częstotliwość kalibracji
Regresja liniowa
Ograniczenia - substancje interferujące
Kryterium: Odzysk w ± 10 % wartości początkowej przy stężeniu
triglicerydów < 2.3 mmol/L (< 200 mg/dL).
Żółtaczka:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika
I wynoszącego 5 dla przybliżonego stężenia związanej i niezwiązanej
bilirubiny (przeciętne stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej: 57 µmol/L
lub 5 mg/dL).
Hemoliza:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H
wynoszącego 200 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 124 µmol/L lub
200 mg/dL).
Endogenny niezestryfikowany glicerol obecny w próbce może fałszywie
zawyżyć wyniki.
Leki: Brak interferencji z najczęściej używanymi lekami w stężeniu
terapeutycznym.11,12 Wyjątki: Kwas askorbinowy i dobecylan wapnia
sztucznie zaniżają poziom triglicerydów w badanych poziomach leku,
lewodopa, metylodopa i fenylobutazon sztucznie zaniżają poziom
triglicerydów przy wysokich stężeniach leku, a Intralipid sztucznie zawyża
poziom triglicerydów przy wysokim stężeniu leku. Dicynone (etamsylat) w
stężeniu terapeutycznym może prowadzić do uzyskania wyników fałszywie
niskich.13
Zatrucia paracetamolem leczy się zazwyczaj podając N‑Acetylocysteinę.
N‑Acetylcysteina w stężeniu osoczowym ponad 333 mg/L oraz metabolit
paracetamolu N‑acetylop-benzochinoimina (NAPQI) mogą niezależnie
prowadzić do uzyskania fałszywie niskich wyników.
Nakłucie żyły należy przeprowadzić przed podaniem metamizolu. Nakłucie
żyły wykonane bezpośrednio w trakcie lub po zakończeniu podawania
metamizolu może doprowadzić do uzyskania wyników fałszywie niskich.
Znaczące interferencje mogą wystąpić w wypadku, gdy stężenie osoczowe
metamizolu będzie powyżej 0.05 mg/mL.
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM
(makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.14
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z
uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o
pacjencie.
WYMAGANA CZYNNOŚĆ
Zaprogramowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych
kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorze
cobas c 111 wymaga się stosowania specjalnych cykli mycia. Informacja
dotycząca kombinacji testów, w której wymagane są specjalne cykle mycia,
zawarta jest w ostatniej wersji listy dodatkowych cykli mycia mających na
celu wyeliminowanie efektu przeniesienia w ulotce metodycznej odczynnika
CLEAN; dalsze postępowanie opisane jest w Podręczniku Użytkownika.
Tam, gdzie to niezbędne, przed podaniem wyników testu należy
2/4
2016-03, V 9.0 Polski
04773187001V9.0
TRIGL
Triglicerydy
wprowadzić specjalne oprogramowanie dotyczące dodatkowego cyklu
mycia/efektu przeniesienia.
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
0.1‑10 mmol/L (8.85‑885 mg/dL)
Próbki o wartościach przekraczających liniowość reakcji należy rozcieńczać
automatycznie przy użyciu funkcji Rerun. Rozcieńczenie próbek za pomocą
funkcji Rerun wynosi 1:10 Wyniki próbek rozcieńczonych za pomocą funkcji
Rerun są automatycznie mnożone przez współczynnik 10.
Dolna granica pomiaru
Dolna granica pomiaru testu:
0.1 mmol/L (8.85 mg/dL)
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie
oznaczanej substancji, które można odróżnić od zera. Oblicza się ją jako
3 odchylenia standardowe najniższego standardu (standard 1 + 3 OS,
powtarzalność, n = 21).
mg/dL
Cholesterol
Triglicerydy
< 5.2
< 2.3
< 200
< 200
Brak
Cholesterol
5.2-7.8
200-300
Tak, jeżeli cholesterol
HDL< 0.9 mmol/L
(< 35 mg/dL)
Cholesterol
Triglicerydy
> 7.8
> 2.3
> 300
> 200
Tak
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić
poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości
referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów cobas c 111 podano poniżej.
Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję oznaczono w oparciu o próbki materiału pochodzące od ludzi i
próbki kontrolne zgodnie z przyjętym protokołem wewnętrznym przy
powtarzalności (n = 21) i precyzji pośredniej (3 próbki w oznaczeniu, 1 ozn.
na dzień, przez 10 dni). Uzyskano następujące wyniki:
Średnia
mmol/L (mg/dL)
OS
mmol/L (mg/dL)
WZ
%
Precinorm U
1.3 (115)
0.01 (1)
0.6
Precipath U
2.2 (195)
0.02 (1)
0.8
Sur. ludzka 1
1.7 (151)
0.02 (2)
1.3
Sur. ludzka 2
5.9 (522)
0.05 (4)
0.8
Precyzja pośrednia
Średnia
mmol/L (mg/dL)
OS
mmol/L (mg/dL)
WZ
%
Precinorm U
1.36 (120)
0.02 (2)
1.6
Precipath U
2.34 (207)
0.04 (4)
1.7
Sur. ludzka 3
1.22 (108)
0.01 (1)
0.9
Sur. ludzka 4
8.64 (765)
0.31 (28)
3.6
Porównanie metod
Wartości triglicerydów w surowicy ludzkiej i osoczu uzyskane w analizatorze
cobas c 111 (y) porównano z uzyskanymi za pomocą tego samego
odczynnika w analizatorze COBAS INTEGRA 400 (x).
Ilość próbek (n) = 73
2016-03, V 9.0 Polski
y = 1.040x – 0.015 mmol/L
τ = 0.976
r = 0.998
Literatura
1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und
Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995.
2 Eggstein M, Kreutz FH. A new determination of the neutral fats in blood
serum and tissue. I. Principles, procedure, and discussion of the
method. Klin Wschr 1966;44(5):262-267.
3 Bucolo G, David H. Quantitative determination of serum triglycerides by
the use of enzymes. Clin Chem 1973;19(5):476-482.
4 Wahlefeld AW, Bergmeyer HU, eds. Methods of Enzymatic Analysis.
2nd English ed. New York, NY:Academic Press Inc 1974;1831.
5 Trinder P. Determination of glucose in blood using glucose oxidase with
an alternative oxygen acceptor. Ann Clin Biochem 1969;6:24-27.
6 Siedel J, Schmuck R, Staepels J, et al. Long term stable, liquid readyto-use monoreagent for the enzymatic assay of serum or plasma
triglycerides (GPO-PAP method). AACC Meeting Abstract 34. Clin
Chem 1993;39:1127.
7 Evans K, Mitcheson J, Laker M. Effect of Storage at 4 °C and -20 °C on
Lipid, Lipoprotein, and Apolipoprotein Concentrations. Clin Chem.
1995;41:392-396.
8 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia,
PA: WB Saunders Company 1995;610-611.
9 Kronenberg F, Lobentanz EM, König P, et al. Effect of sample storage
on the measurement of lipoprotein[a], apolipoproteins B and A-IV, total
and high density lipoprotein cholesterol and triglycerides. J Lipid Res.
1994 Jul;35(7):1318-28.
10 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
11 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
12 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
13 Dastych M, Wiewiorka O, Benovska M. Ethamsylate (Dicynone)
Interference in Determination of Serum Creatinine, Uric Acid,
Triglycerides, and Cholesterol in Assays Involving the Trinder Reaction;
In Vivo and In Vitro. Clin Lab 2014;60:1373-1376.
14 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
15 U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES Public
Health Service, NIH Publication No. 01-3305, May 2001.
16 Study Group, European Atherosclerosis Society. Strategies for the
prevention of coronary heart disease: A policy statement of the
European Atherosclerosis Society. European Heart Journal 1987;8:77.
17 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego,
oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego
stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa
się.
Metaboliczne zaburzenia
lipidowe
Powtarzalność
Regresja liniowa
y = 1.035x – 0.017 mmol/L
Stężenia próbek mieściły się w granicach 0.4 i 10 mmol/L (35 i 885 mg/dL).
Wartości oczekiwane
Według NCEP15
Zakres prawidłowy: < 1.70 mmol/L (< 150 mg/dL)
Interpretacja kliniczna zgodnie z zaleceniami Europejskiego
Stowarzyszenia Miażdżycowego (European Atherosclerosis Society):16
mmol/L
Passing/Bablok17
Symbole
Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche
Diagnostics używa następujących symboli i znaków.
3/4
Zawartość zestawu
Odczynnik
Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu
04773187001V9.0
TRIGL
Triglicerydy
Globalny handlowy numer identyfikacyjny
GTIN
Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie.
© 2016, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Dystrybucka w USA:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
4/4
2016-03, V 9.0 Polski