Informacja o odczynnikach Analizatory, w których można

05403669001V6.0
LIPC
Lipaza test kolorymetryczny
Informacja o odczynnikach
05401704 190
10759350 190
10759350 360
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
10171743 122
10171735 122
10171778 122
10171760 122
04774248 190
05947626 190
05947626 160
05117216 190
05947774 190
05947774 160
04774248190
Lipase colorimetric assay (2 × 50 testów)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL, dla USA)
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precipath U plus (10 × 3 mL)
Precipath U plus (10 × 3 mL, dla USA)
Precinorm U (20 x 5 mL)
Precinorm U (4 x 5 mL)
Precipath U (20 × 5 mL)
Precipath U (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL, dla USA)
PreciControl ClinChem Multi 2 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL, dla USA)
Cleaner
Analizatory, w których można używać niniejszych
zestawów odczynnikowych
cobas c 111
Kod 401
Kod 401
Kod 300
Kod 300
Kod 301
Kod 301
Kod 300
Kod 300
Kod 301
Kod 301
Kod 391
Kod 391
Kod 391
Kod 392
Kod 392
Kod 392
Kod 947
Polski
Informacja o aplikacjach
LIPC: ACN 731
Zastosowanie
Enzymatyczny test in vitro do ilościowego oznaczania lipazy w surowicy
ludzkiej i osoczu w systemach cobas c 111.
Podsumowanie1,2,3,4,5,6,7
Lipazy są glikoproteinami o masie cząsteczkowej 47000 daltonów. Definiuje
się je jako hydrolazy katalizujące trawienie triglicerydów do diglicerydów, a
następnie do monoglicerydów i kwasów tłuszczowych. Przez wiele lat lipazy
trzustkowe, obok α‑amylazy, były bez wątpienia najważniejszymi
parametrami w chemii klinicznej, stosowanymi w diagnostyce różnicowej
chorób trzustki. Oznaczanie aktywności lipazy cieszy się rosnącym
zainteresowaniem ze względu na wysoką swoistość i szybką odpowiedź w
stanach uszkodzenia trzustki. W ostrym zapaleniu trzustki aktywność lipazy
wzrasta w ciągu 4‑8 godzin, osiągając maksimum po 24 godzinach, a
następnie spada po upływie 8 do 14 dni. Nie ma jednak korelacji pomiędzy
oznaczoną w surowicy aktywnością lipazy, a stopniem uszkodzenia trzustki.
Dotychczas opisano wiele metod oznaczania lipazy, w których do
oznaczania spadku ilości substratu wykorzystuje się metody
turbidymetryczne lub nefelometryczne, lub też oznacza się produkty
rozpadu.
Niniejsza metoda oparta jest na rozszczepieniu przez lipazę swoistego,
chromogennego substratu, którym jest zemulgowany kwasami żółciowymi
6-metyloresorufinowy ester kwasu 1,2‑O-dilaurylo-racglicero-3-glutarowego. Aktywność enzymu trzustki jest oznaczana dzięki
zastosowaniu w teście specyficznego połączenia kwasów żółciowych z
kolipazą. W przypadku nieobecności kolipazy aktywność lipazy jest
praktycznie niewykrywalna. Kolipaza aktywuje jedynie lipazę trzustkową i
jest nieaktywna w stosunku do innych enzymów lipolitycznych obecnych w
surowicy. Duże ilości cholanów, dzięki silnie ujemnemu ładunkowi
powierzchniowemu, nie dopuszczają do reakcji esteraz obecnych w
surowicy z chromogennym substratem.
Zasada pomiaru8,9,10,11
Enzymatyczna metoda kolorymetryczna, jako substrat zastosowano ester
kwasu 1,2‑O-dilaurylo-rac-glicero-3-glutarowego (6-metylorezorufiny).
Chromogenny substrat lipazy: ester 6-metyloresorufinowy kwasu 1,2‑Odilaurylo-rac-glicero-3-glutarowego na skutek katalitycznego działania
zasadowego roztworu lipazy przechodzi w 1,2‑O-dilaurylo-rac-glicerol i
nietrwały związek pośredni - zestryfikowany (6-metyloresorufiną) kwas
glutarowy. W środowisku zasadowym ulega on spontanicznemu rozkładowi
2015-11, V 6.0 Polski
do kwasu glutarowego i metyloresorufiny. Dodanie detergentu i kolipazy
zwiększa swoistość testu dla lipazy trzustkowej.
lipaza
6-metyloresorufinowy ester kwasu 1,2-O‑dilaurylo-racglicero-3-glutarowego
1,2‑O-dilaurylo-rac-glicerol + ester 6-metyloresorufinowy kwasu
glutarowego
spontaniczny
ester 6-metyloresorufinowy kwasu
glutarowego
kwas glutarowy +
rozpad
metylorezorufina
Intensywność powstałego czerwonego zabarwienia jest wprost
proporcjonalna do aktywności lipazy i może być zmierzona fotometrycznie.
Oznaczenie jest wykonane poprzez pomiar wzrostu absorbancji przy
długości 583 nm.
Odczynniki - roztwory robocze
R1
Bufor BICINEa): 50 mmol/L, pH 8.0; kolipaza (trzustka wieprzowa):
≥ 0.9 mg/L; deoksycholan‑Na: 1.6 mmol/L; chlorek wapnia:
10 mmol/L; detergent; konserwant
SR
Bufor winianowy: 10 mmol/L, pH 4.16; ester 6-metyloresorufinowy
kwasu 1,2‑O-dilaurylo-rac-glicero-3-glutarowego: 0.27 mmol/L;
taurodeoksycholan: 8.8 mmol/L; detergent; konserwant
a) BICINE = N,N‑bis(2hydroksyetylo)glicyna
Zalecenia i środki ostrożności
Przeznaczone wyłącznie do celów diagnostyki in vitro.
Należy stosować standardowe procedury postępowania z odczynnikami.
Wszelkie odpady należy usuwać zgodnie z lokalnymi przepisami.
Karta charakterystyki produktu dostępna na życzenie.
Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie
Postępowanie z odczynnikami
Gotowy do użycia
1/3
05403669001V6.0
LIPC
Lipaza test kolorymetryczny
Przechowywanie i trwałość
Kalibracja
W temp. 2‑8 °C:
Do daty ważności na
opakowaniu
Używany i schłodzony w analizatorze:
4 tyg.
Uwaga: Po otwarciu chronić przed dostępem światła.
Pobieranie i przygotowanie materiału
W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie
przeznaczone do tego probówki lub pojemniki.
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów
biologicznych wymienionych poniżej.
Surowica
Osocze: Osocze krwi pobranej na heparynę litową
Nie stosować antykoagulantów wiążących wapń, takich jak: EDTA,
cytryniany i fluorki.
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania
oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich
producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych
producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych
przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku
stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle
przestrzegać zaleceń ich producenta.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub
obecnością strątów.
Stabilność:12
1 tyg. w temp. 15‑25 °C
1 tyg. w temp 2‑8 °C
1 rok w temp -20 °C
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach.
Niezbędne materiały dodatkowe (niedostarczone w zestawie)
Zob. część "Informacje o odczynnikach"
Ogólne wyposażenie laboratoryjne
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora,
uwzględniając typ aparatu.
Wszelkie zmiany w aplikacji nie zatwierdzone przez firmę Roche nie
podlegają gwarancji i muszą być zdefiniowane przez użytkownika.
Aplikacja dla surowicy i osocza
Definicja testu cobas c 111
Rodzaj pomiaru
Absorbancja
Model kalkulacyjny absorbancji
Kinetyczna
Kierunek reakcji
Rosnący
Długość fali A/B
583/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
22/27
Jednostka
U/L
Rodzaj reakcji
R1‑S‑SR
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik (H2O)
R1
80 µL
Próbka
2 µL
SR
48 µL
Całkowita objętość
150 µL
20 µL
Kalibratory
Calibrator f.a.s.
Woda dejonizowana używana jest
automatycznie przez analizator jako
kalibrator zerowy.
Tryb kalibracji
Regresja liniowa
Częstotliwość kalibracji
Dla każdej serii oraz zgodnie z procedurami
kontroli jakości
Spójność pomiarowa: Metoda standaryzowana manualnie przy
zastosowaniu kalibrowanych pipet, odczynników firmy Roche oraz
fotometru manualnego, w wyniku której otrzymano wartości absolutne, jak
również specyficzny dla substratu molowy współczynnik absorpcji ε.
Kontrola jakości
Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części
"Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni
materiał kontrolny.
Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane
do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde
laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy
wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym
zakresem.
Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi
zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
Wyliczenie
Analizator cobas c 111 automatycznie oblicza aktywność oznaczanej
substancji dla każdej próbki.
Współczynnik przeliczeniowy: U/L × 0.0167 = µkat/L
Ograniczenia - substancje interferujące
Kryterium: Odzysk w ± 10 % wartości początkowej przy aktywności lipazy
60 U/L (1.00 µkat/L).
Żółtaczka:13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika
I wynoszącego 60 dla przybliżonego stężenia związanej i niezwiązanej
bilirubiny (przeciętne stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej:
1026 µmol/L lub 60 mg/dL).
Hemoliza:13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H
wynoszącego 300 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 186 µmol/L lub
300 mg/dL).
Lipemia (Intralipid):13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika L
wynoszącego 2000. Brak istotnej zależności pomiędzy wskaźnikiem L
(odnosi się do zmętnienia), a stężeniem triglicerydów.
Antykoagulanty: Nie stosować antykoagulantów wiążących wapń, takich
jak: EDTA, cytryniany i fluorki.
Leki: Brak interferencji z najczęściej używanymi lekami w stężeniu
terapeutycznym.14,15
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM
(makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.16
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z
uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o
pacjencie.
WYMAGANA CZYNNOŚĆ
Zaprogramowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych
kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorze
cobas c 111 wymaga się stosowania specjalnych cykli mycia. Informacja
dotycząca kombinacji testów, w której wymagane są specjalne cykle mycia,
zawarta jest w ostatniej wersji listy dodatkowych cykli mycia mających na
celu wyeliminowanie efektu przeniesienia w ulotce metodycznej odczynnika
CLEAN; dalsze postępowanie opisane jest w Podręczniku Użytkownika.
Tam, gdzie to niezbędne, przed podaniem wyników testu należy
wprowadzić specjalne oprogramowanie dotyczące dodatkowego cyklu
mycia/efektu przeniesienia.
2/3
2015-11, V 6.0 Polski
05403669001V6.0
LIPC
Lipaza test kolorymetryczny
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
3‑300 U/L (0.05‑5.01 µkat/L)
Próbki o zwiększonej aktywności należy rozcieńczać automatycznie przy
użyciu funkcji Ponów. Rozcieńczenie próbek za pomocą funkcji Ponów
wynosi 1:2. Wyniki próbek rozcieńczonych za pomocą funkcji Ponów są
automatycznie mnożone przez współczynnik 2.
Dolna granica pomiarowa
Dolny zakres wykrywalności testu:
3 U/L (0.05 µkat/L)
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie
oznaczanej substancji, które można odróżnić od zera. Oblicza się ją jako
3 odchylenia standardowe najniższego standardu (standard 1 + 3 OS,
powtarzalność, n = 21).
Wartości oczekiwane17
Dorośli: 13‑60 U/L (0.22‑1.00 µkat/L)
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić
poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości
referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów cobas c 111 podano poniżej.
Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję oznaczono w oparciu o próbki materiału pochodzące od ludzi i
próbki kontrolne zgodnie z przyjętym protokołem wewnętrznym przy
powtarzalności (n = 21) i precyzji pośredniej (3 porcje w oznaczeniu, 1 ozn.
na dzień, przez 10 dni). Uzyskano następujące wyniki:
Powtarzalność
Średnia
U/L (µkat/L)
OS
U/L (µkat/L)
WY
%
Precinorm U
46.1 (0.770)
0.6 (0.010)
1.3
Precipath U
80.0 (1.33)
0.6 (0.01)
0.8
Sur. ludzka 1
49.6 (0.828)
0.5 (0.008)
1.0
Sur. ludzka 2
248 (4.13)
2 (0.04)
0.9
Precyzja pośrednia
Średnia
U/L (µkat/L)
OS
U/L (µkat/L)
WY
%
Precinorm U
49.0 (0.818)
1.1 (0.018)
2.2
Precipath U
82.9 (1.38)
1.8 (0.03)
2.2
Sur. ludzka 3
50.3 (0.840)
1.3 (0.022)
2.6
Sur. ludzka 4
264 (4.40)
5 (0.08)
1.9
Porównanie metod
Wartości lipazy w surowicy ludzkiej i osoczu uzyskane w analizatorze
cobas c 111 (y) porównano z uzyskanymi za pomocą tego samego
odczynnika w analizatorze COBAS INTEGRA 400 (x).
Ilość próbek (n) = 84
4
Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in
acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102:576-580.
5 Panteghini M, Pagani F, Bonora R, et al. Diagnostic value of four
assays for lipase determination in serum: A comparative reevalution.
Clin Biochem 1991;24:497-503.
6 Tietz NW, Shuey DF. Lipase in serum - the elusive enzyme: An
overview. Clin Chem 1993;39(5):746-756
7 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia
PA: WB Saunders Company 1995;865.
8 Neumann U, Junius M, Batz HG, et al. New substrates for the optical
determination of lipase. EP 207252 1987.
9 Borgström B. The action of bile salts and other detergents on
pancreatic lipase and the interaction with colipase. Biochimica et
Biophysica Acta 1977;488:381-391.
10 Gargouri Y, Julien R, Bois A, et al. Studies on the detergent inhibition of
pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983;24:1336-1342.
11 Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of
serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986;4:60-67.
12 Guder W, Fonseca-Wollheim W, Heil O, et al. Maximum permissible
transport and storage times for analysis of blood (serum, plasma), urine
and cerebrospinal fluid. DG Klinische Chemische Mitteilungen
1995;26:207-224.
13 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
14 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
15 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
16 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
17 Junge W, Abicht K, Goldmann J, et al. Evaluation of the Colorimetric
Liquid Assay for Pancreatic Lipase on Hitachi Analyzers in 7 Clinical
Centers in Europe, Japan and USA. Clin Chem Lab Med
1999;37(Special Suppl):469.
18 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego,
oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego
stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa
się.
Symbole
Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche
Diagnostics używa następujących symboli i znaków.
Zawartość zestawu
Passing/Bablok18
Regresja liniowa
Odczynnik
y = 1.012x + 0.486 U/L
y = 1.012x + 0.516 U/L
Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu
τ = 0.979
r = 1.00
Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 4.88 i 295 U/L (0.081 i
4.92 µkat/L).
Literatura
1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und
Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995.
2 Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed.
Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991:354-361.
3 Kazmierczak S, Catrou P, Van Lente F. Diagnostic accuracy of
pancreatic enzymes evaluated by use of multivariate data analysis. Clin
Chem 1993;39:1960-1965.
2015-11, V 6.0 Polski
Globalny handlowy numer identyfikacyjny
GTIN
Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie.
© 2015, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Dystrybucka w USA:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
3/3