gamma-gt - "Aqua-Med" ZPAM – KOLASA sp.j

GAMMA-GT
ODCZYNNIKI BIOLABO
Rozpuszczalny GPNA
Odczynnik do ilościowego oznaczania
aktywności γ-glutamylotransferazy [ EC 2.3.2.2 ] w ludzkiej surowicy i osoczu.
BIOLABO
PRODUCENT:
WYŁĄCZNY DYSTRYBUTOR:
NR KAT. 80110
R1 8 x 30 mL
R2 8 x 30 mL
BIOLABO SA,
AQUA-MED ZPAM – KOLASA sp. j.,
NR KAT. R80210
R1 5 x 10 mL
R2 5 x 10 mL
02160, Maizy, France
Wólczańska 212, 90-531 Łódź
NR KAT. R80210
R1 10 x 10 mL
R2 10 x 10 mL
AQUA-MED
Tel. : 0-42 636 38 02, 636 37 51
IVD DO DIAGNOSTYKI IN VITRO
Fax : 0-42 637 02 96
ZNACZENIE KLINICZNE (1) (2)
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKÓW
Wprawdzie tkanka nerkowa ma najwyższą
zawartość γglutamylotransfera-zy (GGT), ale enzym obecny w surowicy wydaje się
pochodzić głównie z wątroby i dróg żółciowych. Aktywność GGT jest
podwyższona w każdej z postaci chorób wątroby. Jest najwyższa w
przypadkach
wewnątrz- i zewnątrzwątrobowej niedrożności dróg
żółciowych. Jest bardziej czuła niż ALP i aminotransferazy w wykrywaniu
żółtaczki mechanicznej, zapalenia dróg żółciowych i pęcherzyka
żółciowego. Wzrost, jedynie umiarkowany, pojawia się w zakaźnym
zapaleniu wątroby, przewlekłym alkoholiźmie oraz przy zażywaniu leków
(uspakajających, przeciwdrgawkowych i trankwilizujących). Obniżone
aktywności GGT aktywności są stwierdzane w przypadku
niedoczynności tarczycy.
Ogólnie GGT jest aktualnie najczulszym dostępnym enzymatycznym
wskaźnikiem chorób wątroby i dróg żółciowych, ale nie pozwalającym
na różnicowanie chorób wątroby.
Dodać szybko zawartość butelki R2 (Substrat) do butelki R1 (Bufor).
Wymieszać delikatnie i przed użyciem odczynnika poczekać do
całkowitego rozpuszczenia (ok. 2 minuty).
ZASADA (4) (5)
Metoda Szasz, Rosalki i Tarlow. Schemat reakcji jest następujący :
L-G-Glutamylo-p-nitroanilid
+ Glicyloglicyna
GGT
L-G-Glutamylo-glicyloglicyna
+ p-nitroanilina
Szybkość tworzenia p-nitroaniliny mierzona w 405 nm jest bezpośrednio
proporcjonalna do aktywności GGT w próbce.
SKŁAD ODCZYNNIKÓW
R1
TRWAŁOŚĆ I PRZECHOWYWANIE
Przechowywać w 2-8°C i chronić przed dostępem światła.
• Po otwarciu :
Odczynniki są trwałe do daty ważności na etykiecie.
• Raz otwarte:
Odczynnik roboczy jest trwały minimum 30 dni, jeśli jest wolny od
kontaminacji.
Wyrzucić odczynnik, jeśli jest mętny lub jeśli absorbancja ślepej
odczynnikowej w 405 nm > 0.400.
Zestaw może być transportowany minimum 1 tydzień w temperaturze
pokojowej.
POBIERANIE I PRZYGOTOWANIE PRÓBKI (1) (2)
Niezhemolizowana surowica lub osocze pobrane na EDTA (do 1 mg/ml
krwi). Heparyna powoduje zmętnienie mieszaniny reakcyjnej; cytryniany,
szczawiany i fluorki hamują aktywność GGT o 10 do 15%.
GGT jest trwała w surowicy przez :
• 1 miesiąc w 2-8°C
• 1 rok w –20°C.
BUFFER
Glicyloglicyna
TRIS
pH 8.1
Konserwant
R2
Używać nieostrego narzędzia dla usunięcia aluminiowego kapsla.
62 mmol/L
95 mmol/L
INTERFERENCJE (1) (3)
Hemoliza wpływa na wynik tego testu.
Obszerniejszy przegląd czynników wpływających na to oznaczenie znajduje
się w publikacji Young D.S.
SUBSTRATE
L-G-glutamylo-p-nitroanilid
(GPNA)
2 mmol/L
NIEZBĘDNE NIE DOSTARCZONE MATERIAŁY
1. Podstawowe wyposażanie medycznego laboratorium analitycznego.
2. Prawidłowe i patologiczne surowice kontrolne.
ŚRODKI OSTROŻNOSCI
Odczynniki BIOLABO są przeznaczone do profesjonalnego użytku w
diagnostyce in vitro.
• Pochodne nitroaniliny (produkt reakcji) są toksyczne. Nie wdychać, nie
połykać.
• Używać odpowiedniej ochrony (fartuch, rękawiczki, okulary).
• Nie pipetować ustami.
• Zanieczyszczoną skórę czy zanieczyszczone oczy przemyć starannie
dużą ilością wody i zasięgnąć porady lekarza.
• Odczynniki zawierają azydek sodowy (stężenie < 0,1%) , który może
reagować z miedzią i ołowiem kanalizacji. Wylewając spłukać dużą
ilością wody.
• Pozostałe informacje są zawarte w Karcie Charakterystyki Substancji
Niebezpiecznej.
• Odpady : Przestrzegać przepisów obowiązujących w danym kraju.
Wszystkie próbki powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne
– zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej stosować
odpowiednie
środki
ostrożności.
Przestrzegać
przepisów
obowiązujących w kraju.
KALIBRACJA
Wyniki będą zależały od dokładności kalibracji aparatu, czasu pomiaru
wzrostu absorbancji, przestrzegania stosunku odczynnik/próbka i
kontroli temperatury.
Zaleca się używanie
teoretycznego współczynnika kalibracji lub
wieloparametrowego kalibratora spójnego pomiarowo
z metodą
referencyjną czy materiałem referencyjnym (§ OBLICZENIA).
Wersja : AT R80210 18 08 2005
KONTROLA JAKOŚCI
PROCEDURA MANUALNA
•
BIOLABO EXATROL-N (wartości prawidłowe) NR KAT. R95010
Pozwolić aby odczynnik i próbki osiągnęły temperaturę pokojową.
•
BIOLABO EXATROL-P (wartości patologiczne ) NR KAT. R95011
•
Inne surowice kontrolne odwołujące się do tej samej metody
•
Zewnętrzny program kontroli jakości.
Zaleca się kontrolowanie w następujących przypadkach :
•
Minimum raz na serię.
•
Minimum raz w ciągu 24 godzin.
•
Przy zmianie butelki odczynnika.
•
Po serwisowaniu aparatu.
Jeśli kontrola jest poza zakresem, podjąć następujące działania :
1. Powtórzyć test z tą samą kontrolą.
2. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, przygotować świeżą
surowicę kontrolną i powtórzyć test.
3. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, zweryfikować parametry
oznaczenia : długość fali, temperaturę, stosunek próbka/odczynnik,
czas pomiaru wzrostu absorbancji, współczynnik kalibracji.
4. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, użyć nową butelkę
odczynnika i wykonać oznaczenie ponownie.
5. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, skontaktować się z
działem technicznym BIOLABO lub lokalnym dystrybutorem.
Odpipetować do termostatowanej kuwety o d=1 cm:
Doprowadzić do 37°C (30°C), następnie dodać:
Wymieszać. Odczytać absorbancję początkową po 30 sekundach w 405
nm i następnie ponownie odczytywać absorbancję co minutę w ciągu 3 minut.
Obliczyć wzrost absorbancji na minutę (∆Abs/min).
Uwagi : Procedury na automatyczne analizatory są dostępne na
życzenie. Skontaktować się z działem technicznym BIOLABO.
OBLICZENIA
Obliczyć wynik następująco :
Z teoretycznym współczynnikem :
IU/L = (∆Abs/min) x 2121
Aktywność GGT dla dorosłych mierzona w 37°C
µkat/L =
2 - 30
Kobiety (IU/L)
1 - 24
50 µL
Próbkę lub Kalibrator
WARTOŚCI OCZEKIWANE (2)
Mężczyźni (IU/L)
1 mL
Odczynnik
IU/L
60
Za pomocą surowiczego multikalibratora
(∆Abs/min) badanej
Aktywność GGT =
x Stężenia kalibratora
(∆Abs/min) kalibratora
Każde laboratorium powinno ustalić swoje własne zakresy wartości
prawidłowych dla populacji, dla której świadczy usługi laboratoryjne.
PIŚMIENNICTWO
(1)
CHARAKERYSTYKA DZIAŁANIA
Wewnątrz
serii
N = 30
Poziom
prawidłowy
Poziom
wysoki
Między
Poziom
seriami N
prawidłowy
= 37
Średnia IU/L
29.2
115.1
Średnia IU/L
32.7
188.4
SD IU/L
0.405
2.6
SD IU/L
0.38
1.95
CV %
1.39
2.25
CV %
1.16
1.04
Poziom
wysoki
Granica wykrywalności : ok. 4 IU/L
Czułość dla 21 IU/L : ok. 0.010 ∆Abs/min
Badania porównawcze z komercyjnie dostępnym odczynnikiem :
y = 1.003 x – 4.7246
r = 0.9964
LINIOWOŚĆ
Oznaczenie jest liniowe do 320 IU/L ( 5.33 µkat/L).
Jeśli powyżej, rozcieńczyć próbkę roztworem soli i powtórzyć
oznaczenie biorąc pod uwagę przy obliczaniu wyniku współczynnik
rozcieńczenia. Liniowość będzie zależała od stosunku próbka/odczynnik.
(2)
(3)
(4)
(5)
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 686-689.
Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 286-288.
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995) p.
3-296 à 3-300
SZASZ G., Clin. Chem., (1969), 15, p.124
SZASZ G., Methods of enzymatic analysis, (1974) 2cde éd., 2, p.715
Wyprodukowano we Francji
Wersja : AT R80210 18 08 2005