LDL Direct CP ABX Pentra

ABX Pentra
LDL Direct CP
ABX Pentra LDL Direct CP
Nr ref.: A11A01638
Objętość R1: 28 ml
Objętość R2: 10 ml
Odczynnik diagnostyczny do oznaczania ilościowego
in vitro stężenia cholesterolu w postaci lipoprotein o
niskiej gęstości (LDL-C) w surowicy lub osoczu krwi
ludzkiej metodą kolorymetryczną.
2007/07/09
A93A00162K PL
A11A01638
28 ml
10 ml
Aspekty kliniczne
Lipoproteiny osocza są cząstkami kulistymi i zawierają zróżnicowaną
ilość cholesterolu, triglicerydów, fosfolipidów i białek.
Warstwa
powierzchniowa cząstki lipoproteiny składa się z fosfolipidów, wolnego
cholesterolu oraz białka, jej rdzeń składa się głównie z estrów
cholesterolu i triglicerydów. Cząstki te solubilizują i transportują
cholesterol i triglicerydy w krwioobiegu.
Względne udziały białek i tłuszczów określają gęstość lipoprotein i
pozwalają na ich klasyfikację(1). Lipoproteiny dzielą się na:
chylomikrony, lipoproteiny o bardzo małej gęstości (VLDL), lipoproteiny o
małej gęstości (LDL) oraz lipoproteiny o dużej gęstości (HDL). W
badaniach klinicznych wykazano wielokrotnie, że lipoproteiny zależnie od
klasy mają znaczny i zróżnicowany wpływ na ryzyko wystąpienia choroby
wieńcowej serca (2-4). Wszystkie badania wykazują że cholesterol LDL
jest kluczowym czynnikiem w patogenezie miażdżycy tętnic oraz
chorobie wieńcowej (CAD) (2-8), zaobserwowano też, iż cholesterol HDL
wpływa ochronnie na organizm. Nawet w przypadku, gdy stężenie
cholesterolu całkowitego jest w granicach normy, wzrost poziomu
cholesterolu LDL może być powiązany ze zwiększonym ryzykiem
zapadalności na CAD (4).
Metoda stosowana w oznaczeniach
Metoda ABX Pentra LDL Direct CP jest badaniem jednofazowym,
pozwalającym na bezpośredni pomiar stężenia LDL-C w surowicy lub
osoczu, bez uprzedniego przygotowania próbek, czy wirowania.
Metoda korzysta z dwóch odczynników i opiera się na właściwościach
wyjątkowego detergentu. Detergent (Odczynnik 1) solubilizuje tylko
cząstki lipoprotein inne niż LDL. Uwolniony cholesterol jest zużywany
przez esterazę i oksydazę cholesterolową w reakcji nie dającej
zabarwienia. Drugi detergent (Odczynnik 2) solubilizuje pozostałe
cząsteczki LDL a chromogeniczny czynnik sprzęgający pozwala na
uzyskanie zabarwienia. Reakcja enzymatyczna z LDL-C w obecności
czynnika sprzęgającego daje produkt, którego zabarwienie jest
proporcjonalne do stężenia cholesterolu LDL w próbce.
Odczynnik 2: Bufor MES (pH 6,3)
Detergent 2
N,N-bis-(4-sulfobutylo)-mtoluidyna, sól disodowa (DsBmT)
Konserwant
< 1.0 %
< 1,0 mM
Odczynnika ABX Pentra LDL, Direct CP należy używać zgodnie z
niniejszą ulotką. Firma HORIBA ABX nie może zagwarantować
właściwego działania produktu, jeśli zostanie on użyty w inny od
podanego sposób.
Sposób użycia
Wyjmij obie zatyczki kasety i umieść ją w chłodzonej komorze
odczynnikowej analizatora ABX Pentra 400.
Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za pomocą plastikowej pipety.
Kalibrator
Do celów kalibracji należy używać:
ABX Pentra LDL Cal, Nr ref. A11A01678 (do oddzielnego zakupu)
2 x 1 ml (liofilizat)
Kontrola
Odczynniki
ABX Pentra LDL, Direct CP jest odczynnikiem gotowym do użycia.
< 1.0 %
< 1500 U/l
< 1500 U/l
< 1300 ppg U/l
< 0.1 %
< 3000 U/l
Form-0846 Rev. 2
Odczynnik 1: Bufor MES (pH 6,3)
Detergent 1
Esteraza cholesterolowa
Oksydaza cholesterolowa
Peroksydaza
4-aminoantypiryna
oksydaza kwasu askorbinowego
Konserwant
HORIBA ABX
BP 7290
34184 Montpellier - cedex 4 - France
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Do wewnętrznej kontroli jakości należy używać:
ABX Pentra N Control, nr ref. A11A01653 (do oddzielnego zakupu)
10 x 5 ml (liofilizat)
ABX Pentra P Control, nr ref. A11A01654 (do oddzielnego zakupu)
10 x 5 ml (liofilizat)
Oznaczenie kontroli należy przeprowadzać raz dziennie i/lub po każdej
kalibracji.
Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności powinny być
ustalone w oparciu o wytyczne laboratoryjne oraz przepisy obowiązujące
w danym kraju. Wynik kontroli musi zawierać się w zdefiniowanych
przedziałach ufności. Każde laboratorium powinno wypracować sposób
postępowania w przypadku, gdy wyniki wykroczą poza wyznaczone
przedziały.
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
LDL Direct CP
Wymagane komponenty niewchodzące w skład produktu
• Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny.
• Standardowy sprzęt laboratoryjny.
4. Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki (MSDS)
dołączoną do odczynnika.
Wydajność przy użyciu w analizatorze ABX Pentra 400
Próbka
Próbki pobiera się od pacjentów na czczo.
Materiał zalecany do badań to surowica krwi, osocze traktowane EDTA
lub osocze heparynizowane heparyną sodową.
• Surowica krwi: Pobierz krew pełną stosując wkłucie dożylne i pozostaw
do zakrzepnięcia. Odwiruj i usuń surowicę najszybciej jak to możliwe
po pobraniu (w ciągu 3 godzin) (9).
• Osocze: Próbki mogą być pobierane z EDTA lub heparyną sodową.
Odwiruj i usuń osocze najszybciej jak to możliwe po pobraniu (w ciągu
3 godzin) (9).
Jeśli nie przeprowadza się natychmiastowej analizy próbek, mogą one
być przechowywane w temperaturze 2-8°C do 5 dni.
Jeśli konieczne jest przechowywanie próbek przez okres dłuższy niż
5 dni, można ja przechowywać w temperaturze -80°C. Próbki można
zamrażać tylko raz.
Dodatkowe informacje na temat pobierania próbek, postępowania z nimi
oraz ich przechowywania można uzyskać w dokumentacji NCCLS H18A (10).
Dane przedstawione poniżej pochodzą z oznaczeń przeprowadzonych
przy użyciu analizatora ABX Pentra 400.
Liczba oznaczeń: 100
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu, kaseta z odczynnikiem umieszczona w chłodzonej komorze
analizatora ABX Pentra 400 zachowuje stabilność przez 97 dni.
Objętość próbki: 2,4 μl/oznaczenie
Wykrywalność:
Wykrywalność ustalono zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (11) i
wynosi ona 0,04 mmol/l.
Dokładność i precyzja:
• Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Urządzenie przeprowadza 20 razy oznaczenia dla 3 próbek o niskim,
średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli, zgodnie z zaleceniami
procedury Valtec (11).
UWAGA: Nie należy używać antykoagulantów zawierających cytrynian.
Zakres odniesienia
Stosuje się następujące, zalecane przez NCEP, kryteria klasyfikacji
pacjentów, ukierunkowane na profilaktykę oraz leczenie choroby
wieńcowej (9).
Cholesterol LDL
< 130 mg/dl (< 3,36 mmol/l)
130-159 mg/dl (3,36-4,11 mmol/l)
160 mg/dl (4,14 mmol/l)
Klasyfikacja
Wartości pożądane:
Granica wysokiego ryzyka
Wysokie ryzyko
Zaleca się, aby każde laboratorium ustaliło własny zakres odniesienia.
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Próbka 1
Próbka 2
Próbka 3
Sposób przeprowadzania pomiaru
Opis sposobu przeprowadzania pomiarów przy użyciu urządzeń innych
niż analizator ABX Pentra 400 jest dostępny na życzenie klienta.
Postępowanie z odpadami
Należy postępować zgodnie z lokalnie obowiązującymi przepisami.
Ogólne środki ostrożności
1. Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do profesjonalnej
diagnostyki in vitro.
2. Nie pipetować zasysając ustami.
3. Kasety odczynnikowe są kasetami jednorazowego użytku, należy je
utylizować zgodnie z lokalnymi przepisami.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
CV %
1.01
2.82
0.91
1.00
0.63
• Odtwarzalność (precyzja powtarzania oznaczeń)
Urządzenie przez 20 dni (2 serie na dzień) przeprowadza po dwa
oznaczenia dla 2 próbek o niskim i wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli,
zgodnie z zaleceniami NCCLS, procedura EP5-A (12).
Przechowywanie i stabilność
Odczynniki w nieotwieranych kasetach zachowują przydatność do użycia
do daty ważności podanej na etykiecie, o ile są przechowywane w
temperaturze 2-8°C i chronione przed działaniem światła.
Stabilność po otwarciu: patrz sekcja „Wydajność przy użyciu w
analizatorze ABX Pentra 400”.
Nie wolno zamrażać odczynników.
Wartość średnia
mmol/l
1.58
1.94
2.88
3.66
4.94
Kontrola normalna
Kontrola patologiczna
Próbka 1
Próbka 2
Wartość średnia
mmol/l
1.57
1.92
4.05
4.95
CV %
5.59
6.39
3.94
4.04
Liniowość oraz zakres wartości pomiaru:
Liniowość odczynnika ustalono zgodnie z zaleceniami NCCLS,
procedura EP6-P (13).
Dolna granica liniowości: 0,04 mmol/l
Górna granica liniowości: 10 mmol/l
Korelacja:
99 próbek pobranych od pacjentów koreluje się z komercyjnie dostępnym
odczynnikiem, służącym jako wzorzec, zgodnie z zaleceniami NCCLS,
procedura EP9-A2 (14).
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej wygląda następująco:
Y = 0,9 x + 0,02 przy współczynniku korelacji r2 = 0,9883.
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
LDL Direct CP
Czynniki zakłócające:
Hemoglobina:
Triglicerydy:
Bilirubina
całkowita:
Bilirubina
bezpośrednia:
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
195 μmol/l
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
7 mmol/l
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
500 μmol/l
Nie obserwuje się statystycznie istotnego wpływu do
185 μmol/l
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji jest
kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach kontrolnych.
10. National Comittee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for
the Handling and Processing of Blood Specimens, Approved
Guideline NCCLS Document H18-A, Number 12, Vol. 10, 1990.
11. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
12. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
13. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
14. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples,
Approved Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No.
19, 2002.
Stabilność kalibracji wynosi co najmniej 8 dni.
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w przypadku zmiany
jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki kontroli jakości wykroczą poza
założony zakres.
Współczynnik konwersji:
mmol/l x 0,387 = g/l
mmol/l x 38,7 = mg/dl
Wersja aplikacjia: 3.xx
Ostrzeżenie
Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy dokument dotyczy
używanego odczynnika.
Bibliografia
1. Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual,
’’Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories’’, 1988. I
have also seen this as: Richardson J.H./ and Barkley W.E. eds.
Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, U.S. Dept.
of Health and Human Services, Public Health Service, HHS
Publication No. (CDC) 84-8395, Washington, DC,1984.
2. National Comittee for Clinical Laboratory Standards, Preparation and
Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory - Third Edition;
Approved Guideline NCCLS Document C3-A3, 1997.
3. Gotto A.M., Lipoprotein Metabolism and the Etiology of
Hyperlipidemia, Hospital Practice, 23: Suppl. 1, 4 (1988).
4. Crouse J.R. et al., Studies of low density lipoprotein molecular weight
in human beings with coronary artery disease, J. Lipid Res., 26; 566
(1985).
5. Badimon, J.J. et al., Regression of Atherosclerotic lesions by High
Density Lipoprotein Plasma Fraction in the cholesterol-Fed Rabbit,
Journal of Clinical Investigation, 85:1234 (1990).
6. Castelli W.P. et al., HDL Cholesterol anf Other Lipids in Coronary
Heart Disease, Circulation, 55:767 (1977).
7. Barr D.P. et al., Protein-lipid Relationships in Human Plasma, Am. J.
Med., 11:480 (1951).
8. Gordon T. et al., High density lipoprotein as a protective factor
against coronary heart disease, Am. J. Med., 62; 707 (1977).
9. Bachorik P.S. et al., National Cholesterol Education Program
Recommendations for Measurement of Low-Density Lipoprotein
Cholesterol: Executive Summary, Clinical Chemistry, Vol. 41, No. 10,
1414-1433 (1995).
a. Modyfikacja indeksu od J do K: Usunięcie indeksu dolnego.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com
ABX Pentra
LDL Direct CP
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji dostępna jest na stronie: www.horiba-abx.com