Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być

0003004732122COINV9.0
LDHI2
Dehydrogenaza mleczanowa według IFCC wersja 2.
Enzymy
Informacja o odczynnikach
03004732 122
Lactate Dehydrogenase acc. to IFCC ver.2 300 testów
ID systemowe 07 6607 0
10759350 190
10759350 360
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
10171743 122
10171735 122
10171778 122
10171760 122
05117003 190
05947626 190
05947626 160
05117216 190
05947774 190
05947774 160
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL, dla USA)
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precipath U plus (10 x 3 mL)
Precipath U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precinorm U (20 × 5 mL)
Precinorm U (4 × 5 mL)
Precipath U (20 × 5 mL)
Precipath U (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL, dla USA)
PreciControl ClinChem Multi 2 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL, dla USA)
ID systemowe 07 3718 6
ID systemowe 07 3718 6
ID systemowe 07 7999 7
ID systemowe 07 7999 7
ID systemowe 07 8000 6
ID systemowe 07 8000 6
ID systemowe 07 7997 0
ID systemowe 07 7997 0
ID systemowe 07 7998 9
ID systemowe 07 7998 9
ID systemowe 07 7469 3
ID systemowe 07 7469 3
ID systemowe 07 7469 3
ID systemowe 07 7470 7
ID systemowe 07 7470 7
ID systemowe 07 7470 7
Analizatory, w których mogą być używane
odczynniki cobas c pack
COBAS INTEGRA 400 plus
COBAS INTEGRA 800
Polski
SR
Informacja o aplikacjach
Test LDHI2, ID testu 0‑607
R1 jest w pozycji B, a SR jest w pozycji C.
Zastosowanie
Test in vitro do ilościowego oznaczania aktywności katalitycznej LDH
(EC 1.1.1.27; L‑mleczanu: NAD+ oksydoreduktaza) w surowicy i osoczu w
systemach COBAS INTEGRA.
Podsumowanie1,2,3,4
Dehydrogenaza mleczanowa (LDH) jest enzymem szeroko
rozpowszechnionym w tkankach organizmu, szczególnie w sercu, wątrobie,
mięśniach i nerkach. W oparciu o ruchliwość elektroforetyczną z LDH
surowicy wyodrębniono pięć izoenzymów. Każdy z izoenzymów jest
tetramerem złożonym z dwóch różnych podjednostek. W oparciu o budowę
łańcucha polipeptydowego wyróżnia się podjednostkę sercową i mięśniową.
Istnieją dwa homotetramery: LDH‑1 (sercowy) i LDH‑5 (mięśniowy), oraz
trzy izoenzymy heterotetrameryczne.
Podwyższoną aktywność LDH obserwuje się w różnych stanach
chorobowych. Najwyższy poziom występuje u pacjentów z niedokrwistością
megaloblastyczną, rozsianym nowotworem i we wstrząsie. Średni wzrost
występuje w schorzeniach mięśni, zespole nerczycowym i marskości.
Łagodny wzrost aktywności LDH odnotowano w przypadku zawału mięśnia
sercowego lub płuc, białaczki, niedokrwistości hemolitycznej i
niewirusowego zapalenia wątroby.
Niniejsza metoda jest zgodna z zaleceniami Międzynarodowej Federacji
Chemii Klinicznej (International Federation of Clinical Chemistry - IFCC).5
Zasada pomiaru
Próba UV
Dehydrogenaza mleczanowa katalizuje utworzenie pirogronianu z
L‑mleczanu; podczas tego procesu NAD+ ulega redukcji do NADH.
LDH
L‑mleczan + NAD+
pirogronian + NADH + H+
Ilość powstałego NADH jest wprost proporcjonalna do aktywności
katalitycznej LDH. Oznaczenie jest wykonane poprzez pomiar wzrostu
absorbancji przy długości 340 nm.
Odczynniki - roztwory robocze
R1
N‑Metylo‑D‑glukamina: 400 mmol/L, pH 9.4 (37 ℃); mleczan litu:
62 mmol/L; stabilizatory; konserwanty
2016-02, V 9.0 Polski
NAD: 62 mmol/L; stabilizatory; konserwanty
Zalecenia i środki ostrożności
Należy przestrzegać wszelkich zaleceń oraz środków ostrożności
zawartych w rozdziale 1, "Wstęp".
Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie
Zestaw zawiera składniki sklasyfikowane zgodnie z Wytyczną (UE)
nr 1272/2008, w następujący sposób:
chlorek hydroksyloamoniaku
EUH 208
Może powodować wystąpienie reakcji alergicznej.
Oznakowanie wyrobu dotyczące bezpieczeństwa wg. wytycznych EU GHS.
Postępowanie z odczynnikami
Gotowy do użycia
Przechowywanie i trwałość
W temp. 2‑8 °C
Do daty ważności na
etykiecie cobas c pack
System COBAS INTEGRA 400 plus
W analizatorze w temperaturze 10‑15 °C
12 tyg.
System COBAS INTEGRA 800
W analizatorze w temp. 8 °C
12 tyg.
Pobieranie i przygotowanie materiału
W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie
przeznaczone do tego probówki lub pojemniki.
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów
biologicznych wymienionych poniżej.
Surowica (wolna od hemolizy)
Osocze (wolne od hemolizy): Osocze krwi pobranej na heparynę (Li-, Nalub NH4+-)
Nie stosować innych antykoagulantów. Należy unikać zanieczyszczenia
osocza płytkami krwi, które charakteryzują się wysoką aktywnością
dehydrogenazy mleczanowej.6,7 Dla laboratoriów uzyskujących
niemiarodajne wyniki spowodowane gradientem dehydrogenazy
mleczanowej w probówkach pierwotnych z osoczem, dostępna jest
aplikacja LDIP2 (0-507; nie dostępna w USA).
Oddzielić surowicę lub osocze od krwinek i niezwłocznie oznaczyć.8
1/4
LDHI2
0003004732122COINV9.0
LDHI2
Dehydrogenaza mleczanowa według IFCC wersja 2.
Enzymy
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania
oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich
producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych
producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych
przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku
stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle
przestrzegać zaleceń ich producenta.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub
obecnością strątów.
Stabilność:9
7 dni w temp. 15‑25 °C. Próbkę można
przechowywać przez 4 dni w temp. 2‑8 °C lub
6 tyg. w temp. ‑20 °C. W wypadku połączenia z
niektórymi chorobami (np. hapatopatie, choroby
mięśni szkieletowych, guzy złośliwe) następuje
wzrost porcji izoenzymów LDH‑4 i LDH‑5; są
one niestabilne w schłodzonych lub
zamrożonych próbkach; może to prowadzić do
uzyskania nieprawidłowych wartości LDH w
próbkach pobranych od pacjentów chorych na
powyższe choroby.
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach.
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora,
uwzględniając typ aparatu.
Definicja testu COBAS INTEGRA 400 plus
Absorbancja
Model kalkulacyjny absorbancji
Kinetyczna
Rodzaj reakcji
R1‑S‑SR
Kierunek reakcji
Rosnący
Długość fali A/B
340/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
48/64
Jednostka
U/L
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik
(H2O)
R1
100 µL
Próbka
4 µL
4 µL
SR
20 µL
10 µL
Całkowita objętość
138 µL
Definicja testu COBAS INTEGRA 800
Rodzaj pomiaru
Absorbancja
Model kalkulacyjny absorbancji
Kinetyczna
Rodzaj reakcji
R1‑S‑SR
Kierunek reakcji
Rosnący
Długość fali A/B
340/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
70/98
Jednostka
U/L
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik
(H2O)
LDHI2
100 µL
Próbka
4 µL
4 µL
SR
20 µL
10 µL
Całkowita objętość
138 µL
Kalibracja
Kalibrator
Calibrator f.a.s.
Jako kalibratora zerowego należy
użyć wody dejonizowanej.
Tryb kalibracji
Regresja liniowa
Powtórzenie kalibracji
Zalecana w duplikacie
Częstotliwość kalibracji
Dla każdej serii oraz zgodnie z
procedurami kontroli jakości
Spójność pomiarowa: Metoda wystandaryzowana manualnie wobec
oryginalnej formuły IFCC (2002).
Kontrola jakości
Zakresy referencyjne
Precinorm U, Precinorm U plus lub
PreciControl ClinChem Multi 1
Zakresy wartości nieprawidłowych
Precipath U, Precipath U plus lub
PreciControl ClinChem Multi 2
Częstotliwość kontroli
Zalecana co 24 godz.
Sekwencja kontroli
Definiowana przez użytkownika
Kontrola po kalibracji
Zalecana
Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części
"Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni
materiał kontrolny.
Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane
do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde
laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy
wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym
zakresem.
Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi
zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
Aplikacja dla surowicy i osocza
Rodzaj pomiaru
R1
Wyliczenie
Analizatory COBAS INTEGRA automatycznie obliczają stężenie
oznaczanej substancji dla każdej próbki. Więcej informacji zawarto w
rozdziale "Dane Analityczne" na stronie internetowej Online Help
(analizatory COBAS INTEGRA 400 plus/800).
Współczynnik przeliczeniowy: U/L × 0.0167 = μkat/L
Ograniczenia - substancje interferujące
Kryterium: Odzysk w granicach ± 10 % wartości początkowej.
Surowica/osocze
Żółtaczka:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika
I wynoszącego 60 dla związanej i niezwiązanej bilirubiny (przybliżone
stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej: 1026 µmol/L lub 60 mg/dL).
Hemoliza:10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H
wynoszącego 10 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 6 µmol/L lub
10 mg/dL).
Lipemia (Intralipid):10 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika L
wynoszącego 2000. Brak istotnej zależności pomiędzy wskaźnikiem L
(odnosi się do zmętnienia), a stężeniem triglicerydów.
Leki: Brak interferencji z najczęściej używanymi lekami w stężeniu
terapeutycznym.11,12
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM
(makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.13
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z
uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o
pacjencie.
WYMAGANA CZYNNOŚĆ
Programowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych
2/4
2016-02, V 9.0 Polski
0003004732122COINV9.0
LDHI2
Dehydrogenaza mleczanowa według IFCC wersja 2.
Enzymy
kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorach
COBAS INTEGRA obowiązkowe jest stosowanie specjalnych cykli mycia.
Dalsze instrukcje oraz najnowsza wersja Dodatkowych Cykli Mycia, zob.
ulotka metodyczna odczynnika CLEAN.
Tam, gdzie to konieczne, przed podaniem wyników testu należy
wprowadzić mający na celu uniknięcie efektu przeniesienia specjalny
program dodatkowego cyklu mycia.
Analizator Roche/Hitachi 917
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
10‑1000 U/L (0.167‑16.7 µkat/L)
Próbki o wartościach przekraczających liniowość reakcji należy rozcieńczać
automatycznie przy użyciu funkcji Rerun. Rozcieńczenie próbek za pomocą
funkcji Rerun wynosi 1:10. Wyniki próbek rozcieńczonych za pomocą
funkcji Ponów są automatycznie mnożone przez współczynnik 10.
Dolna granica pomiaru
Dolna granica wykrywalności:
10 U/L (0.167 µkat/L)
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie
oznaczanej substancji, które można odróżnić od zera. Oblicza się je jako
3 odchylenia standardowe powyżej próbki zerowej (wzorzec
zerowy + 3 OS, powtarzalność n = 21).
Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 66 i 1465 U/L (1.10 i
24.5 µkat/L).
Wartości oczekiwane
Zgodnie z IFCC mierzone w temp. 37 °C:14
Kobiety
135‑214 U/L
(2.25‑3.55 µkat/L)
Mężczyźni
135‑225 U/L
(2.25‑3.75 µkat/L)
Dzieci (2‑15 lat)
120‑300 U/L
(2.00‑5.00 µkat/L)
Noworodki (4‑20 dni)
225‑600 U/L
(3.75‑10.0 µkat/L)
do 250 U/L
(do 4.2 µkat/L)
Wartości uzgodnione:15
Mężczyźni i kobiety
Firma Roche nie dokonała oznaczeń zakresów referencyjnych w populacji
pediatrycznej.
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić
poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości
referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów COBAS INTEGRA podano
poniżej. Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję oznaczono w oparciu o próbki materiału pochodzące od ludzi i
próbki kontrolne zgodnie z przyjętym protokołem wewnętrznym przy
powtarzalności (n = 21) i precyzji pośredniej (1 próbki w oznaczeniu, 1 ozn.
na dzień, przez 21 dni). Otrzymano następujące wyniki.
Powtarzalność
Średnia
WZ
Precyzja pośrednia
Średnia
WZ
Poziom 1
Poziom 2
149 U/L
(2.5 µkat/L)
236 U/L
(3.9 µkat/L)
1.0 %
0.6 %
Poziom 1
Poziom 2
155 U/L
(2.6 µkat/L)
246 U/L
(4.1 µkat/L)
1.1 %
1.1 %
Porównanie metod
Wartości LDH w surowicy ludzkiej i osoczu oznaczone w analizatorze
COBAS INTEGRA 700 z użyciem odczynnika COBAS INTEGRA Lactate
Dehydrogenase acc. to IFCC ver.2 (LDHI2) (y) porównano z wartościami
uzyskanymi przy użyciu podobnego odczynnika w analizatorze
Roche/Hitachi 917 (x), oraz poprzedniego odczynnika (LDHI) w
analizatorze COBAS INTEGRA 700 (x).
Ilość próbek (n) = 69
2016-02, V 9.0 Polski
Passing/Bablok16
Regresja liniowa
y = 1.032x - 3.57 U/L
y = 0.995x + 6.86 U/L
т = 0.969
r = 0.998
OS (md 95) = 20.1
Sy.x = 11.7
Analizator COBAS INTEGRA 700
Passing/Bablok16
Regresja liniowa
y = 1.017x - 2.89 U/L
y = 1.003x - 0.316 U/L
т = 0.985
r = 1.000
OS (md 95) = 8.45
Sy.x = 4.35
Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 66 i 1419 U/L (1.10 i
23.7 µkat/L).
Literatura
1 Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 4th ed. Marburg: Die Medizinische
Verlagsgesellschaft 1992.
2 Moss DW, Henderson AR, Kachmar JF. Enzymes. In: Tietz NW, ed.
Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB
Saunders 1987;346-421.
3 Zimmerman HJ, Henry JB In: Henry JB, ed. Clinical Diagnosis and
Management by Laboratory Methods. 17th ed.Philadelphia, PA: WB
Saunders 1984;251-282.
4 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia
PA: WB Saunders Company 1995;251-282.
5 Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, et al. IFCC Primary Reference
Procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentrations of
Enzymes at 37 °C – Part 3. Reference Procedures for the
Measurement of Catalytic Concentrations of Lactate Dehydrogenase.
Clin Chem Lab Med 2002;40(6):643-648.
6 Bais R, Philcox M. Approved recommendations of IFCC methods for
the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 8. IFCC
method for lactate dehydrogenase. International Federation of Clinical
Chemistry (IFCC). Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32(8):639-655.
7 Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed.
Pa: WB Saunders Co 1999;669.
8 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia
PA: WB Saunders Company 1995;384-385.
9 Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO
Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2. Jan. 2002.
10 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
11 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
12 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
13 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
14 Lorentz K, Röhle G. Einführung der neuen Standardmethoden 1994 zur
Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentration bei 37 °C. Klin
Chem Mitt 1995;26:290-293.
15 Thomas L, Müller M, Schumann G, et al Consensus of DGKL and
VDGH for interim reference intervals on enzymes in serum. J Lab Med
2005; 29(5):301-308.
16 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III.
J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
3/4
LDHI2
0003004732122COINV9.0
LDHI2
Dehydrogenaza mleczanowa według IFCC wersja 2.
Enzymy
W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego,
oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego
stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa
się.
Symbole
Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche
Diagnostics używa następujących symboli i znaków.
Zawartość zestawu
Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu
Globalny handlowy numer identyfikacyjny
GTIN
Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie.
© 2015, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Dystrybucka w USA:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
LDHI2
4/4
2016-02, V 9.0 Polski