Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być

Transkrypt

0003029590322COINV8.0
LIPC
Lipaza metodą kolorymetryczną
Enzymy
Informacja o odczynnikach
03029590 322
Lipase colorimetric (200 testów)
ID systemowe 07 5900 7
10759350 190
10759350 360
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
10171743 122
10171735 122
10171778 122
10171760 122
05117003 190
05947626 190
05947626 160
05117216 190
05947774 190
05947774 160
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL)
Calibrator f.a.s. (12 × 3 mL, dla USA)
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precipath U plus (10 x 3 mL)
Precipath U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precinorm U (20 × 5 mL)
Precinorm U (4 × 5 mL)
Precipath U (20 × 5 mL)
Precipath U (4 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (20 × 5 mL)
PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 mL, dla USA)
PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 mL, dla USA)
Polski
Ester kwasu 1,2‑O‑dilaurylo-rac-glicero-3‑glutaro-(6‑metylorezorufinowego)
1,2‑O-dilaurylo-rac-glicerol + Ester kwasu glutaro(6‑metylorezorufinowego)
Informacja o aplikacjach
Test LIPC, ID testu 0‑100
Zastosowanie
Test in vitro do ilościowego oznaczania aktywności katalitycznej lipazy
(EC 3.1.1.3; triacyloglicerolo acylo‑hydrolazy) w surowicy i osoczu w
systemach COBAS INTEGRA.
Podsumowanie1,2,3,4,5,6,7
Lipazy są glikoproteinami o masie cząsteczkowej 47000 daltonów. Definiuje
się je jako hydrolazy katalizujące trawienie triglicerydów do diglicerydów, a
następnie do monoglicerydów i kwasów tłuszczowych. Przez wiele lat lipazy
trzustkowe, obok α-amylazy, były bez wątpienia najważniejszymi
parametrami w chemii klinicznej, stosowanymi w diagnostyce różnicowej
chorób trzustki. Oznaczanie aktywności lipazy cieszy się rosnącym
zainteresowaniem ze względu na wysoką swoistość i szybką odpowiedź w
stanach uszkodzenia trzustki. W ostrym zapaleniu trzustki aktywność lipazy
wzrasta w ciągu 4‑8 godzin, osiągając maksimum po 24 godzinach, a
następnie spada po upływie 8 do 14 dni. Nie ma jednak korelacji pomiędzy
oznaczoną w surowicy aktywnością lipazy, a stopniem uszkodzenia trzustki.
Dotychczas opisano wiele metod oznaczania lipazy, w których do
oznaczania spadku ilości substratu wykorzystuje się metody
turbidymetryczne lub nefelometryczne, lub też oznacza się produkty
rozpadu.
Zasada pomiaru8,9,10,11
Enzymatyczna metoda kolorymetryczna, jako substrat zastosowano ester
kwasu 1,2‑O‑dilaurylo-rac-glicero‑3‑glutarowego‑(6‑metylorezorufinowego).
Chromogeniczny substrat lipazy ester kwasu
1,2‑O‑dilaurylo‑rac‑glicero‑3‑glutarowego‑(6‑metyloresorufinowego) jest
rozszczepiany w reakcji katalitycznej roztworu lipazy zasadowej, tworząc
1,2‑Odilaurylo‑rac‑glicerol oraz niestabilną formę przejściową, ester kwasu
glutarylo‑(6‑metyloresorufinowego). W środowisku zasadowym ulega on
spontanicznemu rozkładowi do kwasu glutarowego i metyloresorufiny.
Dodanie detergentu i kolipazy zwiększa swoistość testu dla lipazy
trzustkowej. W przypadku nieobecności kolipazy aktywność lipazy jest
praktycznie niewykrywalna. Kolipaza aktywuje jedynie lipazę trzustkową i
jest nieaktywna w stosunku do innych enzymów lipolitycznych obecnych w
surowicy. Obecne w dużych ilościach cholany dzięki silnie ujemnemu
ładunkowi powierzchniowemu zapewniają ochronę chromogenicznego
substratu przed działaniem zawartych w surowicy esteraz.
2015-11, V 8.0 Polski
Analizatory, w których mogą być używane
odczynniki cobas c pack
COBAS INTEGRA 400 plus
COBAS INTEGRA 800
ester kwasu glutaro(6‑metylorezorufinowego)
kwas glutarowy +
metylorezorufina
Natężenie powstałego zabarwienia jest wprost proporcjonalne do
aktywności lipazy w próbce. Oznaczenie jest wykonane poprzez pomiar
wzrostu absorbancji przy długości 583 nm.
Odczynniki - roztwory robocze
R1
Bufor BICIN: 50 mmol/L, pH 8.0; kolipaza (trzustka wieprzowa):
≥ 0.9 mg/L; deoksycholan‑Na: 1.6 mmol/L; chlorek wapnia:
10 mmol/L; detergent; konserwant
SR
Bufor winianowy: 10 mmol/L, pH 4.16; ester kwasu 1,2‑O‑dilaurylorac-glicero-3‑glutaro-(6‑metylorezorufinowego): 0.27 mmol/L;
taurodeoksycholan: 8.8 mmol/L; detergent; konserwant
R1 jest w pozycji B, a SR jest w pozycji C.
Zalecenia i środki ostrożności
Należy przestrzegać wszelkich zaleceń oraz środków ostrożności
zawartych w rozdziale 1, "Wstęp".
Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie
Postępowanie z odczynnikami
Gotowy do użycia
Przechowywanie i trwałość
W temp. 2‑8 °C
Do daty ważności na
etykiecie cobas c pack
System COBAS INTEGRA 400 plus
W analizatorze w temperaturze 10‑15 °C
4 tyg.
System COBAS INTEGRA 800
W analizatorze w temp. 8 °C
4 tyg.
Pobieranie i przygotowanie materiału
W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie
przeznaczone do tego probówki lub pojemniki.
1/3
LIPC
0003029590322COINV8.0
LIPC
Enzymy
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie próbek
wymienionych poniżej.
Surowica: pobrać surowicę używając standardowych probówek do
pobierania próbek. Preferowanym materiałem jest świeża surowica.
Osocze: Osocze krwi pobranej na heparynę litową
Nie stosować antykoagulantów wiążących wapń, takich jak: EDTA,
cytryniany i fluorki.
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania
oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich
producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych
producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych
przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku
stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle
przestrzegać zaleceń ich producenta.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub
obecnością strątów.
R1
80 µL
Próbka
2 µL
SR
48 µL
Całkowita objętość
150 µL
Stabilność:12
Spójność pomiarowa: Metoda standaryzowana manualnie wobec
odczynnika Roche.
1 tydz. w temp. 15‑25 °C
1 tydz. w temp. 2‑8 °C
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach.
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora,
uwzględniając typ aparatu.
Aplikacja dla surowicy i osocza
Model kalkulacyjny absorbancji
Kinetyczna
Rodzaj reakcji
R1‑S‑SR
Kierunek reakcji
Rosnący
Długość fali A/B
583/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
43/51
Jednostka
U/L
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik
(H2O)
R1
80 µL
Próbka
2 µL
SR
48 µL
Całkowita objętość
150 µL
20 µL
Definicja testu COBAS INTEGRA 800
Rodzaj pomiaru
Absorbancja
Model kalkulacyjny absorbancji
Kinetyczna
Rodzaj reakcji
R1‑S‑SR
Kierunek reakcji
Rosnący
Długość fali A/B
583/659 nm
Odczyt pierwszy/ostatni
62/75
Jednostka
U/L
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik
(H2O)
LIPC
Kalibrator
Calibrator f.a.s.
Jako kalibratora zerowego należy
użyć wody dejonizowanej.
Tryb kalibracji
Regresja liniowa
Powtórzenia kalibracji
Zalecana w duplikacie
Częstotliwość kalibracji
Dla każdej serii oraz zgodnie z
procedurami kontroli jakości
Zakresy referencyjne
Precinorm U, Precinorm U plus lub
PreciControl ClinChem Multi 1
Zakresy wartości nieprawidłowych
Precipath U, Precipath U plus lub
PreciControl ClinChem Multi 2
Częstotliwość kontroli
Zalecana co 24 godz.
Sekwencja kontroli
Definiowana przez użytkownika
Kontrola po kalibracji
Zalecana
Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części
"Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni
materiał kontrolny.
Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane
do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde
laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy
wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym
zakresem.
Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi
zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
Definicja testu COBAS INTEGRA 400 plus
Absorbancja
Kalibracja
Kontrola jakości
1 rok w temp. (‑15)‑(‑25) °C
Rodzaj pomiaru
20 µL
Wyliczenie
Analizatory COBAS INTEGRA automatycznie obliczają aktywność
oznaczanej substancji dla każdej próbki. Więcej informacji zawarto w
rozdziale "Dane Analityczne" na stronie internetowej (Analizatory COBAS
INTEGRA 400 plus/800).
Współczynnik przeliczeniowy: U/L × 0.0167 = μkat/L
Ograniczenia - substancje interferujące
Kryterium: Odzysk w granicach ± 10 % wartości początkowej.
Surowica/osocze
Żółtaczka:13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika
I wynoszącego 60 dla przybliżonego stężenia związanej i niezwiązanej
bilirubiny (przeciętne stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej:
1026 µmol/L lub 60 mg/dL).
Hemoliza:13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H
wynoszącego 1000 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 621 µmol/L lub
1000 mg/dL).
Lipemia (Intralipid):13 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika L
wynoszącego 2000. Brak istotnej zależności pomiędzy wskaźnikiem L
(odnosi się do zmętnienia), a stężeniem triglicerydów.
Leki: Brak interferencji z najczęściej używanymi lekami w stężeniu
terapeutycznym.14,15
Antykoagulanty: Nie stosować antykoagulantów wiążących wapń, takich
jak: EDTA, cytryniany i fluorki.
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM
(makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.16
2/3
2015-11, V 8.0 Polski
0003029590322COINV8.0
LIPC
Enzymy
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z
uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o
pacjencie.
WYMAGANA CZYNNOŚĆ
Programowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych
kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorach
COBAS INTEGRA obowiązkowe jest stosowanie specjalnych cykli mycia.
Dalsze instrukcje oraz najnowsza wersja Dodatkowych Cykli Mycia, zob.
ulotka metodyczna odczynnika CLEAN.
Tam, gdzie to konieczne, przed podaniem wyników testu należy
wprowadzić mający na celu uniknięcie efektu przeniesienia specjalny
program dodatkowego cyklu mycia.
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
3.0‑300 U/L (0.05‑5.0 µkat/L)
Próbki o zwiększonej aktywności należy rozcieńczać automatycznie przy
użyciu funkcji Rerun. Rozcieńczenie próbek za pomocą funkcji Rerun
wynosi 1:2. Wyniki próbek rozcieńczonych za pomocą funkcji Rerun są
automatycznie mnożone przez współczynnik 2.
Dolna granica pomiarowa
Dolna granica wykrywalności:
3.0 U/L (0.05 µkat/L)
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie
oznaczanej substancji, które można odróżnić od zera. Oblicza się je jako
3 odchylenia standardowe powyżej próbki zerowej (wzorzec
zerowy + 3 OS, powtarzalność n = 30).
Wartości oczekiwane17
Dorośli
13‑60 U/L
(0.22‑1.00 µkat/L)
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić
poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości
referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów COBAS INTEGRA podano
poniżej. Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję oznaczono w oparciu o surowice ludzkie i próbki kontrolne
zgodnie z przyjętym protokołem wewnętrznym przy powtarzalności i
precyzji pośredniej (3 próbki w oznaczeniu, 1 ozn. na dzień, przez 21 dni).
Uzyskano następujące wyniki:
Poziom 1
Poziom 2
42.3 U/L
(0.706 µkat/L)
153 U/L
(2.55 µkat/L)
Powtarzalność WZ
1.2 %
1.4 %
Wartość średnia precyzji
WZ
2.7 %
3.2 %
Średnia
Porównanie metod
Wartości lipazy dla surowicy ludzkiej i osocza uzyskane w analizatorze
COBAS INTEGRA 700 za pomocą odczynnika do metody kolorymetrycznej
COBAS INTEGRA Lipase (y) porównano z uzyskanymi za pomocą
podobnego odczynnika w analizatorze Roche/Hitachi 917 (x).
Ilość próbek (n) = 58
Passing/Bablok18
Regresja liniowa
y = 1.027x + 2.30 U/L
y = 1.030x + 2.93 U/L
т = 0.925
r = 0.999
Aktywność w próbkach wahała się pomiędzy 13.8 i 277 U/L (0.230 i
4.65 µkat/L).
Literatura
1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und
Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995.
2 Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed.
Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991:354-361.
2015-11, V 8.0 Polski
3
Kazmierczak S, Catrou P, Van Lente F. Diagnostic accuracy of
pancreatic enzymes evaluated by use of multivariate data analysis. Clin
Chem 1993;39:1960-1965.
4 Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in
acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102:576-580.
5 Panteghini M, Pagani F, Bonora R, et al. Diagnostic value of four
assays for lipase determination in serum: A comparative reevalution.
Clin Biochem 1991;24:497-503.
6 Tietz NW, Shuey DF. Lipase in serum - the elusive enzyme: An
overview. Clin Chem 1993;39(5):746-756
7 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia
PA: WB Saunders Company 1995;865.
8 Neumann U, Junius M, Batz HG, et al. New substrates for the optical
determination of lipase. EP 207252 1987.
9 Borgström B. The action of bile salts and other detergents on
pancreatic lipase and the interaction with colipase. Biochimica et
Biophysica Acta 1977;488:381-391.
10 Gargouri Y, Julien R, Bois A, et al. Studies on the detergent inhibition of
pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983;24:1336-1342.
11 Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of
serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986;4:60-67.
12 Guder W, Fonseca-Wollheim W, Heil O, et al. Maximum permissible
transport and storage times for analysis of blood (serum, plasma), urine
and cerebrospinal fluid. DG Klinische Chemische Mitteilungen
1995;26:207-224.
13 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
14 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
15 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
16 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
17 Junge W, Abicht K, Goldmann J, et al. Evaluation of the Colorimetric
Liquid Assay for Pancreatic Lipase on Hitachi Analyzers in 7 Clinical
Centers in Europe, Japan and USA. Clin Chem Lab Med
1999;37(Special Suppl):469.
18 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
for method transformation. Application of linear regression procedures
for method comparison studies in clinical chemistry, Part III.
J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego,
oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego
stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa
się.
Symbole
Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche
Diagnostics używa następujących symboli i znaków.
Zawartość zestawu
Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu
Globalny handlowy numer identyfikacyjny
GTIN
Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie.
© 2015, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Dystrybucka w USA:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
3/3
LIPC

Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być

Transkrypt

Podobne dokumenty

Informacja o odczynnikach Analizatory, w których można