Opis procedury Wytyczne do oznaczania Lp(a) w surowicy

Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
Lp(a) w surowicy/osoczu
przy uŜyciu urządzenia Hitachi 917
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia lipoproteiny (a) w próbkach materiału pochodzenia ludzkiego
z wykorzystaniem turbidymetrii przy uŜyciu urządzenia Hitachi 917 (1, 2).
Zakres pomiarowy
Około 80–1800 mg/L, w zaleŜności od konkretnej partii kalibratora. Zakres moŜe zostać poszerzony do 40–3600 mg/L
w przypadku późniejszego zagęszczenia lub rozcieńczenia.
Zakres normy
<300 mg/L. Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z „Ustawieniami urządzenia” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciała
Bufor
Rozcieńczalnik
Kalibrator
Próby kontrolne
Próbki
Ludzka surowica lub osocze z EDTA pobrane od pacjentów wstrzymujących się od jedzenia.
Trwałość przez 2 dni w temperaturze 2–8ºC.
Trwałość przez 3 miesiące w temperaturze -20ºC
ZamroŜone próbki naleŜy rozmraŜać w temperaturze 37°C i dobrze wymiesza ć przed wykonaniem oznaczenia.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor (R1)
Bufor jest gotowy do uŜytku. W analizatorze stabilny do 28 dni.
Przeciwciało (R3)
Przeciwciała są gotowe do uŜytku.
W sporadycznych przypadkach przeciwciała są lekko mętne - zaleca się wówczas przefiltrowanie ich przez filtr
z błoną 0,22 µm.
Stabilność przeciwciał: do terminu waŜności podanego na etykiecie.
Stabilność w urządzeniu: 28 dni.
Nr kat.
Q0023
S2011
S2005
X0958
X0961
X0962
Nazwa
Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human Lipoprotein (a)
Dako Reaction buffer 4
Dako Dilution Buffer 1
Dako Human Serum Lipoprotein Calibrator
Dako Human Serum Lipoprotein Low Control
Dako Human Serum Lipoprotein High Control
Wydajność: 1 mL przeciwciał umoŜliwia dokonanie około 40 odczytów kuwet wzorców lub próbek. Przy obliczaniu
wymaganej objętości odczynnika naleŜy wziąć pod uwagę nieuŜyteczną objętość buteleczki.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 28 dni, po zmianie partii odczynnika, po przefiltrowaniu przeciwciał lub w
przypadku, gdy jakość wyników spadnie poniŜej poziomu przyjętego w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli wydajność jest nieakceptowalna, naleŜy dokonać ponownej kalibracji. Zweryfikować odczynniki i procedurę.
Jeśli problem nie ustępuje, naleŜy skontaktować się z dostawcą urządzenia, dystrybutorem odczynników lub
obsługą działu technicznego firmy Dako.
(119233-001)
30 190.Q0023.01/PIL/PL/2008.11.11 str. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,258 w urządzeniu Hitachi 917 odpowiada stęŜeniu wynoszącemu ok.
1780 mg/L
Lipoproteina (a).
Limit detekcji
Szacunkowy limit detekcji wynosi 57 mg/L.
Precyzja
Precyzję określono poprzez przebadanie próbek na 4 róŜnych poziomach lipoproteiny (a) metodą analityczną
ANOVA w 6 seriach. W kaŜdej serii wykonano nową kalibrację i po 6 oznaczeń.
Lipoproteina
(a)
Wartość
średnia
(mg/L)
1
2
3
4
Surowica
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Razem
Całk. wsp.
zmienności (%)
n
4,89
5,512
2,9
32
3,76
9,68
10,39
1,7
36
169,9
3,88
6,83
7,86
4,6
35
1212,6
8,61
41,29
42,18
3,5
34
W serii
Między
seriami
189,7
2,54
610,2
Dokładność
W przypadku kontroli Dako Human Serum Lipoprotein (a) Low Control, nr kat. X0961 i Dako Human Serum
Lipoprotein (a) High Control, nr kat. X0962, moŜna spodziewać się odzysku lipoproteiny (a) na poziomie 90-110%.
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 80–1800 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stęŜenia antygenu dla stęŜenia lipoproteiny (a) do 3572 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stęŜeniach do 10 g/L hemoglobiny oraz 600 mg/L bilirubiny.
Zakłócenia mogą być widoczne w próbkach zawierających trójglicerydy i/lub czynnik Reuma.
Porównanie metod
Oznaczanie lipoproteiny (a) zgodnie z niniejszą procedurą porównano z innymi dostępnymi komercyjnie testami
turbidymetrycznymi. Dane dostępne są na Ŝyczenie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001;39:1098-1109.
2. Hitachi 917 manual(s).
(119233-001)
30 190.Q0023.01/PIL/PL/2008.11.11 str. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Ustawienia urządzenia (program w wersji 7146020-02-48)
An a ly z e
A s sa y/T im e/P oint
W av e (2n d/Prim a ry )
S .V ol (N or m al)
S .V ol (D ec re as e)
S .V ol (Inc re as e)
D il uent
R ea gen t(R 1 ) T 1
R ea gen t(R 2 ) T 2
R ea gen t(R 3 ) T 3
R ea gen t(R 4 ) T 4
A bs . L im it
P roz on e Lim it
C el l De te rge nt
2Po int E nd
70 0
34 0
10.0
0 ,0
5 .0
0 ,0
20.0
0 ,0
10
15
0
0
0
0
0
301*
25 0
0
25
0
320 00
320 00
34
T im in g
0
009 01*
0
009 01*
20
009 01*
0
009 01*
Inc r eas e
34
U ppe r
0
0
0
0
R1
R2
R3
2 An aly s is
D e te r g e n t 1
C a li b
C al ibra ti on T yp e
P oint
W eig ht
L ogit-L og 4P
6
S p a n P o in t
4
A uto C alibr ation
B lank
S pan
2 P oint
F ul l
T im e o ut
0
0
0
0
C ha nge o ve r
L ot
B ottl e
S D L im it
D up lic ate Lim i t
S ens itiv ity L im it
S 1 ABS L im it
99 9
99
-9 999 9
-3 200 0
%
3200 0
Ab s
999 99
320 00
R a ng e
A ppli ca ti on C ode
R ep ort N am e
D ata M od e
C on tr ol Interv al
Intru m ent Fa c to r (Y = a x+ b )
T ec h nic al Li m it
R ep eat Lim it
009 01*
L(pa )
a=
0
U ni t
On Bo ard
0*
1 .0
0
b=
St.1+0.01 S t.6
E xp ec te d Val ue
( M ale)
100 Y
100 Y
( Fe m ale)
100 Y
100 Y
-999 99
-999 99
-999 99
-999 99
-999 99
-999 99
R ange 1
M ale
( De fa ult)
Q u a lit a tiv e
C a n ce l
(1)
0
-(2)
0
(3)
0
+(4)
0
++
(5)
0 + ++
(6)
++ ++
999 99
999 99
999 99
999 99
999 99
999 99
O th e r s
S ta nda rd
C al ibra ti on C ode
C on c entratio n
P os ition*
S am ple
P re.
D il .
1
2
001
00 2
0.08 77
0.2174
x C (c a l) x C (c al)
3
00 3
0 .5 000
x C (c al)
4
00 4
1.000
x C( c al)
5
005
1.300
x C ( c al)
6
006
2.00 00
x C ( ca l)
3
3
3
3
3
3
2 5.0
1 0.0
260
25.0
10.0
90
5 .0
0 .0
0
10.0
0.0
0
1 3.0
0.0
0
2 0.0
0.0
0
Rozcieńczalnik – nr kat. S2005
R1 – nr kat. S2011
R3 – nr kat. Q0023
(119233-001)
[*]
Definiowane przez klienta.
[**]
Obliczone stęŜenie względne Std.1 i Std.6. Aby generowane były ostrzeŜenia o próbkach, w których stęŜenie jest
niŜsze od stęŜenia w najniŜszym wzorcu, dolny limit techniczny musi być o 0,01 g/L wyŜszy od najniŜszego wzorca.
[***]
Kalibrator, nr kat. X0958. StęŜenie wylicza się jako współczynnik pomnoŜony przez wartość kalibratora dla danej partii
(podaną w g/L na karcie parametrów analitycznych X0958). Liczba miejsc dziesiętnych dla Std.1 określa liczbę cyfr po
przecinku na wydruku. Zaleca się dwie cyfry po przecinku.
30 190.Q0023.01/PIL/PL/2008.11.11 str. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17