WAPŃ CPC
Transkrypt
WAPŃ CPC
WAPŃ CPC Zestaw odczynnikowy do oznaczania stężenia wapnia Nr kat. 5033.1 Tylko do diagnostyki in vitro 3 x 50 ml (R1: 3 x 40 ml; R2: 1 x 30 ml) ZASTOSOWANIE Zestaw służy do oznaczania stężenia wapnia w surowicy i osoczu krwi lub w moczu. ZASADA METODY Metoda z o-krezoloftaleiną. W reakcji jonów wapnia z o-krezoloftaleiną w środowisku alkalicznym powstaje fioletowy kompleks, którego absorbancja mierzona przy długości fali 540 - 590 nm jest proporcjonalna do stężenia wapnia w próbce. MATERIAŁ DO BADAŃ Surowica lub osocze krwi pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami. Jako antykoagulant należy stosować heparynę. Mocz z dobowej zbiórki zakwaszony 10 ml 6 M kwasu solnego – kwas solny należy dodać do pojemnika kolekcyjnego przed rozpoczęciem zbiórki moczu. Próbki można przechowywać do 7 dni w temp. 2-8°C. WARTOŚCI PRAWIDŁOWE Surowica, osocze: 8,6 – 10,3 mg/dl (2,2 – 2,6 mmol/l) Mocz (zbiórka dobowa): 100 – 250 mg/24 h (2,50 – 6,25 mmol/24 h) Podane wartości należy traktować jako orientacyjne. Zaleca się, aby każde laboratorium określiło własne zakresy wartości prawidłowych. SKŁAD ODCZYNNIKÓW R1 Kwas solny o-Krezoloftaleina 8-Hydroksychinolina R2 Amino-metylo-propanol Cyjanek potasu Niereaktywne stabilizatory i detergenty. 38 mmol/l 50 µmol/l 6,9 mmol/l 1,4 mol/l 15 mmol/l PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKA ROBOCZEGO Zmieszać odczynniki R1 i R2 w stosunku 4 + 1. Odczynnik roboczy jest stabilny przez 2 tygodnie w temp. 2-8°C, 7 dni w temp. 15-25°C w zamkniętym naczyniu lub 2 dni w temp. 15-25°C w otwartym naczyniu. PRZECHOWYWANIE ODCZYNNIKÓW Przechowywać w temp. 2-8°C w oryginalnych, zamkniętych opakowaniach. Chronić przed kontaminacją i bezpośrednim światłem słonecznym. Nie zamrażać. Po otwarciu odczynniki prawidłowo przechowywane i chronione przed zanieczyszczeniem są stabilne do daty ważności podanej na opakowaniu. CHARAKTERYSTYKA UŻYTKOWA Limit detekcji: 0,3 mg/dl (0,08 mmol/l) Czułość: 25 mA x dl / mg (100 mA x l / mmol) Liniowość: 15 mg/dl (3,75 mmol/l). Dla wyższych stężeń próbkę należy rozcieńczyć 0,9 % roztworem NaCl w stosunku 1+2; wynik oznaczenia pomnożyć przez 3. Powtarzalność (w serii oznaczeń): poziom I II 18 n 18 6,22 14,6 średnia (mg/dl) 1,56 3,64 średnia (mmol/l) < 2,50 % < 1,50 % % CV Odtwarzalność (między seriami oznaczeń): poziom I II 18 n 18 6,18 14,5 średnia (mg/dl) 1,55 3,63 średnia (mmol/l) < 3,00 % < 2,00% % CV Korelacje: Badania korelacji wyników z wynikami uzyskanymi za pomocą odczynników referencyjnych nie wykazały znaczących różnic. Dokładne wyniki badań są dostępne na życzenie. Interferencje: Bilirubina do 20 mg/dl nie wpływa na wyniki oznaczenia. Nie należy stosować surowic lipemicznych. Inne substancje i leki mogą interferować. KONTROLA POPRAWNOŚCI DZIAŁANIA Do kontroli jakości oznaczeń stosować surowice kontrolne z wartościami wapnia zmetrykowanymi dla metody z o-krezoloftaleiną (CPC, OCP). Nie stosować odczynników, jeżeli absorbancja odczynnika roboczego mierzona wobec wody przy długości fali 570 nm jest wyższa niż 0,220. DODATKOWE MATERIAŁY I WYPOSAŻENIE - Fotometr lub analizator automatyczny umożliwiający absorbancji przy długości fali 570 (540 - 590) nm. - Wzorzec wapnia lub kalibrator - Standardowe wyposażenie laboratorium diagnostycznego. pomiar WYKONANIE OZNACZENIA Do kuwet napipetować: Próba Wzorzec/ próbka odczynnikowa Odczynnik roboczy 1000 µl 1000 µl Doprowadzić do temperatury oznaczenia (37°C lub 25°C), następnie dodać: Wzorzec/próbka --10 µl Dokładnie wymieszać, inkubować przez 5 min. w temp. w temp. 37°C lub przez 10 min. w temp. w temp. 25°C. Odczytać absorbancję końcową (A) dla wzorca i próbek przy długości fali 570 (540 - 590) nm wobec próby odczynnikowej (PO). OBLICZENIA A (Próbki) Stężenie wapnia = ------------------ x stęż. wzorca A (Wzorca) 19-12-2007 INFORMACJE DODATKOWE 1. Odczynnik R2 zawiera aminometylopropanol i śladowe ilości cyjanku potasu i jest klasyfikowany jako drażniący. Unikać kontaktu ze skórą i oczami. 2. Odpady utylizować zgodnie z obowiązującymi przepisami – przez termiczne przekształcanie lub odpowiednimi metodami obróbki fizyczno-chemicznej. 3. Aplikacje do analizatorów automatycznych dostarczamy na życzenie. 4. Wzorzec wapnia lub multikalibrator do analizatorów automatycznych należy nabywać osobno. REFERENCJE 1. Mooorehead W. R., Biggs H. G.: 2-Amino-2-methyl-1-propanol as the alkalizing agent in an improved continous-flow cresolphtalein complexone procedure for calcium in serum. Clin. Chem., 20/11, 1458-1460 (1974). 2. Tietz N. W.: Clinical guide to laboratory tests, 3rd edition, Saunders Co. 1999. 3. Young D. S.: Effects of drugs on clinical laboratory tests, AACC Press, 4th ed. (1995). 19-12-2007