.-TRIGLICERYDY
Transkrypt
.-TRIGLICERYDY
Nr kat 11528 4 x 50 ml «( PRZECHOWYWAC W TEMP. 2-8'C Odczynniki do pomiaru st~zenla triglicerydow Tylko do uzytku in vitro w laboratorium kllnicznym Trlgllcerydy w proble badanej, w wyniku sprz~zonych reakcjl przedstawionych ponizej, tworzq barwny kompleks, ktory mozna zmierzyc spektrofotometrycznie '-2. Trlglicerydy + H20 TRIGLICERYDY OKSYDAZA GLiCEROFOSFORANU/PEROKSYDAZA W celu weryfikacji wykonanla procedury oznaczenia zaleca si~ uzywanie surowicy kontrolnej blochemlcznej poziom t (nr kat 18005, 18009 I 18042) I pozlom II (nr kat 18007, 18010 I 18043). Kazde laboratorium powlnno ustalic wtasny, wewn~trzny system kontroll jakoscl I procedur naprawczych jezell wartoscl kontrolne nie mieszczq si~ w zakresle dopuszczalnych tolerancji. kinaz3 glicerolowa Glicerol +ATP .- ) G·3·P-oksydaza Gllcerol - 3 -P + 0, ) Fosfodwuhydroksyaceton +H,O, peroksydaza -----) Chinonoimlna + 4 H,O - Granica detekcjl: 1.6 mg/dl ; 0.018 mmolll - Granica linlowosci: 600 mg/dl ; 6.78 mmolA. przy wyzszych wartosciach rozclenczyc prob~ wodq destylowanq w stosunku 1:4 I powtorzyc pomiar. - Powtarzalnosc (wewnqtrzseryjna): 5rednie sl'i!zenie 100 mg/dl ~ 1.13 mmol! 245 mg/dl ~ 2.77 mmol! A. Odczynnik: Pipes 45 mmolll, chlorek magnezu 5 mmolll, 4-chlorofenol 6 mmolll, lipaza > 100 Ulml, kinaza glicerolowa > 1.5 Ulml, oksydaza gliceroI0-3-fosforanowa > 4 Ulml, peroksydaza > 0.8 U/ml, 4-aminoantypiryna 0.75 mmol/l, ATP 0.9 mmolll, pH 7.0 Odtwarzalnosc (mi~dzyseryjna): Srednie sl~i.enie 100 mg/dl ~ 1.13 mmol! 245 mg/dl ~ 2.77 mmol! S. Standard trigllcerydow: Glicerol odpowiadalqcy st~zeniu 200 mgldl (2.26 mmolll) trioleiny. Pierwotny standard ciekly. - Czulosc12 PRZECHOWYWANIE - Przechowywac w temp. 2-8'C. Odczynnlk I standard Sq stabilne do daty waznosci podanej na etykiecie, jezetl Sq szczelnle zamkni~te oraz jezeli nle dopusci si~ do ich zanieczyszczenia podczas uzycla. Poprawnosc: Wynlki uzyskane przy uzyciu tego odczynnika nie wykazaly rMnic systematycznych w porownaniu z odczynnikami referencyjnymi (Uwaga 2). Szczegoly badan porownawczych dosl~pne Sq na zyczenie. - Interterencje: Hemogloblna (10 gm nie interteruje. Billrubina (2.5 mg/dl) moze interferowac. Inne leki i sUbstancje mogq interferowac'. Oznakl zepsucla: - Odczynnik: Obecnosc zawiesiny, zm~tnienle, absorbancja slepej powyzej 0.150 przy 500 nm (kuweta z drogq optycznq 1 cm). Standard: Obe:nosc zawiesiny, zm~tnlenie. mA·dLlmg ; 112 mA·Llmmol Podana charakterystyka metrologiczna zosfala uzyskana w przypadku uzycia anallzatora. Wynikl mogq roznic sl~ przy uzyciu innego aparatu lub w procedurze manualnej. Triglicerydy sq estraml glicerolu i kwasow tluszczowych pochodzqcymi z pokarmu lub syntezy, gl6wnie w wqtroble. Trlgllcerydy Sq transportowane w osoczu przez lipoprotelny I wykorzystywane przez tkanki tluszczowe, mi~snle, Itp. Ich glownq funkcjq jest dostarczanle energli komorkom. - Termostatowana laznia wodna 0 temp. 37'C - Analizator, spektrofotometr lub fotometr z tiltrem 0 dlugoscl tali 500 ± 20 nm MATERIAL Podwyzszone st~ienle trigllcerydow w surowicy moze byc spowodowane przez choroby wqtroby, cukrzyc~, nerczyc~, niedoczynnosc tarczycy, alkohollzm, rodzinnq hiper1ipoprotelneml~ typu IV I V oraz inne schorzenlaJ·'. Dlagnoza kllniczna nle powinna byc stawiana na podstawie wynikow pojedynczego badanla, ale powlnna Iqczyc zarowno dane kliniczne jak I laboratoryjne. DO BADAN Surowica lub osocze pobrane zgodnie ze standardowyml procedurami. Triglicerydy w surowicy lub osoczu Sq stabilne przez 5 dnl w temp. 2-8'C. Heparyna, EDTA, szczawiany I fluorki mogq byc uzywane jako antykoagulanty. 2. Kalibracja za pomocq dostarczonego standardu ciek/ego moze powodowaC blqd pomiaru (bias) spowodowany roznicq podloza, szczegolnie w przypadku niektorych analizatorow. W tych przypadkach zaleca sl~ kalibracj~ przy uzyciu standardu na bazie surowicy (Kalibrator biochemiczny, nr kat. 18011 i 18044). 1 Doprowadzic odczynnik do temperatury pokojowej. 2 Odpipetowac do oznaczonych probowek (Uwaga 1)' I Standard trigliceryd6w (S) Pr6ba bad ana Odczynnlk (AI Pr6ba slepa Standard - 10 I~ - - - 10 ml 10ml 10 I~ 10ml Pr6ba bad ana 1. Bucolo G and David H. Quantitative determination of serum trigiycerides by use of enzymes. Cfin Chern 1973; 19: 476·482. 3. Dokladnle wymieszac I inkubowac probowkl przez 15 minut w temp. pokojowej (16-25'C) tub przez 5 minut w temp. 37'C. 4. Zmierzyc absorbancj~ (A) standardu I proby badanej przy 500 nm wobec proby slepej. Barwa jest stabilna przez przynajmnlej 2 godziny. 2. Fossati P and Prenclpe L. Serum triglycendes determined colorimetric ally with an enzyme that produces hydrogen peroxide. Cfin Chern 1982; 28: 2077-2080. 3. National Cholesterol Educarlon Program Expert Panel. Third report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol In Adults (ATP III). NIH Publication. Bethesda: National Heart, Lung, and Blood Institute; 2001. 4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press, 1995. St~zenle trlgllcerydow w proble obllcza sl~ przy zastosowaniu ponizszego ogolnego wzoru: 5. Fnedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997. APrOby ----xC_"" 1. Odczynnik ten moze byc stosowany w analizatorach automatycznych. Aplikacje do wielu z nich dost~pne Sq na zyczenie. ;C"'." A5uIndlrdu x 200 ~ mgldtlngllceryd6w x 2.26 = mmolllingliceryd6w Podane wartosci graniczne zostaly ustalone przez US National Institutes of Health I przyj~te rowniez w wielu innych krajach do oceny ryzykii'. 00 150 mg/dl ~ 1.7 mmc;! Normalne 150·199 mg/dl ~ 1.70-2.25 mmol! Graniczne - wysokie 200·499 mg/dl ~ 2.26-5.64 mmol! Wysokie > 500 mg/dl ~ Bardzo wysokie > 5.65 mmol! WytW('lfca: BioSystcl1ls !SO 13~S; ISO n 'I Ij{jf)f. S..A. Co:'ta Bra,-a .10, Ihrcc!n!1(l (Ilif'Zprll1ia) '/{}lfin!,,,,d· Tl if 'CJ;RT- R~~.:SX (/)O/O}Xj R~t!..:fJ' f{)()(j()96 {j(){jl