TRIGLICERYDY

TRIGLICERYDY
Odczynnik do oznaczania stężenia triglicerydów
Tylko do diagnostyki in vitro
4 x 50 ml
4 x 100 ml
Nr kat. 5031.10200
Nr kat. 5031.20400
ZASTOSOWANIE
Odczynnik służy do oznaczania stężenia triglicerydów w surowicy i
osoczu krwi.
ZASADA METODY
LPL
triglicerydy + H2O → glicerol + kwasy tłuszczowe
GYK
glicerol + ATP → 3-P-glicerol + ADP
GPO
3-P-glicerol + O2 → dihydroksyaceton-P + H2O2
POD
2H2O2 + 4-AA + 4-chlorofenol → chinonoimina + 4H2O
Lipaza hydrolizuje triglicerydy do glicerolu i kwasów tłuszczowych.
Glicerol w obecności kinazy glicerolu i ATP ulega fosforylacji do
3-P-glicerolu. Oksydaza 3-P-glicerolu katalizuje reakcję powstawania
H2O2. Nadtlenek wodoru reaguje z 4-chlorofenolem i 4-aminoantypiryną
tworząc barwny kompleks. Intensywość zabarwienia jest wprost
proporcjonalna do stężenia triglicerydów.
MATERIAŁ DO BADAŃ
Surowica lub osocze pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami.
Jako antykoagulanty mogą być stosowane: heparyna, EDTA, szczawian
lub fluorek. Próbki można przechowywać do 5 dni w temp. 2-8°C.
WARTOŚCI PRAWIDŁOWE
do 150 mg/dl (1,7 mmol/l) – normalne
150 – 199 mg/dl (1,70 – 2,25 mmol/l) – graniczne
200 – 499 mg/dl (2,26 – 5,64 mmol/l) – wysokie
> 500 mg/dl (> 5,65 mmol/l) – bardzo wysokie
Podane zakresy zostały ustalone przez US National Institutes of Health
i należy je traktować jako orientacyjne. Zaleca się, aby każde
laboratorium określiło własne zakresy wartości prawidłowych.
SKŁAD ODCZYNNIKA
Bufor PIPES pH 7,00
4-Chlorofenol
4-Aminoantypiryna (4-AA)
ATP
Kinaza glicerolowa (GK)
Peroksydaza (POD)
Lipaza lipoproteinowa (LPL)
Oksydaza fosfoglicerolowa (GPO)
Azydek sodu
Niereaktywne stabilizatory i detergenty.
50 mmol/l
2,7 mmol/l
0,4 mmol/l
2,0 mmol/l
> 0,64 kU/l
> 1,6 kU/l
> 5,6 kU/l
> 3,2 kU/l
< 13,9 mmol/l
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKA
Odczynnik jest gotowy do użycia.
PRZECHOWYWANIE
Przechowywać w temp. 2-8°C w oryginalnych, zamkniętych
opakowaniach. Chronić przed kontaminacją i bezpośrednim działaniem
światła. Nie zamrażać.
Po otwarciu odczynnik prawidłowo przechowywany i chroniony przed
zanieczyszczeniem jest stabilny do daty ważności podanej na
opakowaniu.
PARAMETRY UŻYTKOWE
Limit detekcji: 2 mg/dl (0,02 mmol/l)
Czułość: 0,65 mA x dl / mg (57 mA x l / mmol)
Liniowość: 1000 mg/dl (11,3 mmol/l). Dla wyższych stężeń próbkę
należy rozcieńczyć 0,9 % roztworem NaCl w stosunku 1+1; wynik
oznaczenia pomnożyć przez 2.
Powtarzalność (w serii oznaczeń):
poziom
I
II
20
20
n
128,3
222,1
średnia (mg/dl)
1,45
2,51
średnia (mmol/l)
< 2,50
< 2,00
% CV
Odtwarzalność (między seriami oznaczeń):
poziom
I
II
20
20
n
128,7
222,5
średnia (mg/dl)
1,45
2,50
średnia (mmol/l)
< 3,50
< 2,50
% CV
Korelacja:
Badania korelacji wyników z wynikami uzyskanymi za pomocą
odczynników referencyjnych nie wykazały znaczących różnic. Dokładne
wyniki badań są dostępne na życzenie.
Interferencje:
Bilirubina do 10 mg/dl i kwas askorbinowy do 5 mg/dl nie wpływają na
wyniki oznaczeń.
Inne substancje i leki mogą interferować.
KONTROLA POPRAWNOŚCI DZIAŁANIA
Do kontroli jakości oznaczeń stosować surowice kontrolne z wartościami
triglicerydów zmetrykowanymi dla metody enzymatycznej (GPO-PAP) z
lipazą, kinazą glicerolu, oksydazą 3-P-glicerolu i peroksydazą lub dla
innej, równoważnej metody.
Nie stosować odczynnika, jeżeli jego absorbancja mierzona wobec wody
przy długości fali 500 nm jest wyższa niż 0,200.
DODATKOWE MATERIAŁY I WYPOSAŻENIE
- Fotometr lub analizator automatyczny umożliwiający
absorbancji przy długości fali w zakresie 490 – 550 nm.
- Wzorzec triglicerydów lub kalibrator.
- Standardowe wyposażenie laboratorium diagnostycznego.
pomiar
WYKONANIE OZNACZENIA
Do probówek reakcyjnych napipetować:
Próba
Wzorzec / próbka
odczynnikowa
(PW / PB)
(PO)
Odczynnik
1000 µl
1000 µl
Doprowadzić do temperatury oznaczania, następnie dodać:
Wzorzec/próbka
--10 µl
Wymieszać, inkubować 5 min. w temp. 37°C lub 10 min. w temp. 25°C.
Odczytać absorbancję próby wzorcowej i próby badanej wobec próby
odczynnikowej przy dł. fali 490 - 550 nm. Zabarwienie jest stabilne przez
przynajmniej 30 minut.
19-12-2007
OBLICZENIA
A (PB)
Stężenie triglicerydów = -------- x stęż. wzorca
A(PW)
INFORMACJE DODATKOWE
1. Odczynnik zawiera śladowe ilości chlorofenolu i azydku sodu. Przy
pracy z odczynnikiem stosować środki ostrożności typowe dla
rutynowych prac laboratoryjnych.
2. Odpady utylizować zgodnie z obowiązującymi przepisami – przez
termiczne przekształcanie lub odpowiednimi metodami obróbki
fizyczno-chemicznej.
3. Aplikacje do analizatorów automatycznych dostarczamy na
życzenie.
4. Wzorzec triglicerydów i multikalibrator do analizatorów
automatycznych należy nabywać osobno.
REFERENCJE
1. Fossati P., Prencipe L.: Serum triglycerides determined
colorimetrically with an enzyme that produces hydrogen peroxide.
Clin. Chem. 28/10, 2077-2080 (1982).
2. McGowan M. W., Artiss J. D., Strandbergh D. R., Zak B.: A
peroxidase-coupled method for the colorimetric determination of
serum triglycerides. Clin. Chem. 29/3, 538-542 (1983).
3. Young D. S.: Effects of drugs on clinical laboratory tests, AACC
Press, 4th ed. (1995).
4. National Cholesterol Education Program Expert Panel. Third report
of the National Cholesterol Educational Program (NCEP). Expert
panel on detection, evaluation and treatment of high blood
cholesterol in adults. NIH Publication. Bethesda: National Heart,
Lung and Blood Institute (2001).
STOSOWANE SYMBOLE GRAFICZNE - OBJAŚNIENIA:
CONT.
zawartość
numer katalogowy
przed użyciem zapoznać się z instrukcją
wyrób do diagnostyki in vitro
temperatura przechowywania
producent
numer serii
data ważności
19-12-2007