CHLORKI

CHLORKI
ODCZYNNIKI
BIOLABO
Metoda kolorymetryczna
Odczynnik do ilościowego oznaczania chlorków w ludzkim osoczu,
surowicy, płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF) lub moczu
BIOLABO
PRODUCENT:
Nr KAT. 80005 R1 2 x 125 mL
BIOLABO SA,
R2 1 x 5 mL
02160, Maizy, France
AQUA-MED
Tel : 0-42 636 38 02, 636 37 51
IVD DO DIAGNOSTYKI IN VITRO
Fax : 0-42 637 02 96
ZNACZENIE KLINICZNE (1)
TRWAŁOŚĆ I PRZECHOWYWANIE
Jony chlorkowe są głównym zewnątrzkomórkowym anionem. Razem z
jonami sodowymi chlorki odgrywają zasadniczą rolę w w utrzymaniu
prawidłowego rozmieszczenia płynów zewnątrzustrojowych, ich ciśnienia
osmotycznego i równowagi kationowej.
Zmniejszone stężenie osoczowych Cl jest obserwowane w zapaleniu
nerek z utratą soli (np. w przewlekłym odmiedniczkowym zapaleniu
nerek). Obserwowana jest wtedy także hiponatremia. Hipochloremia jest
często obserwowana w kwasicy metabolicznej (np. w cukrzycowej
ketokwasicy i niewydolności nerek). Trwała, nadmierna sekrecja soków
żołądkowych i długotrwałe wymioty, niezależnie od przyczyny, powodują
dużą utratę Cl i ostatecznie hipochloremię wraz z niedoborem
ustrojowym Cl .
Wzrost stężenia osoczowych Cl pojawia się wraz z odwodnieniem,
kwasicą kanalikową proksymalną (RTA), ostrą niewydolnością nerek,
metaboliczną kwasicą w przebiegu długotrwałej biegunki i utraty
wodorowęglanu sodowego …
Przechowywać w 18-25°C i chronić przed dostępem światła.
• Nie otwarte : Odczynniki są trwałe do daty ważności na etykiecie
• Po otwarciu : Odczynnik (R1) jest trwały minimum 3 miesiące, jeśli jest
wolny od kontaminacji.
Trwałość wzorca (R2) : Kilka tygodni po otwarciu (przenieść potrzebną
ilość, zamknąć ponownie i przechowywać w 18-25°C).
Wyrzucić odczynnik, jeśli jest mętny lub jeśli ślepa odczynnikowa
w 500 nm > 0.100.
Zestaw może być transportowany w temperaturze pokojowej.
-
-
HgCl2 + 2SCN
3+
3(SCN) + Fe
-
Fe(SCN)3
Jony chlorkowe reagują z niezdysocjowanym tiocyjanianem rtęciowym z
utworzeniem niezdysocjowanego chlorku rtęciowego i wolnych jonów
tiocyjanianowych. Jony tiocyjanianowe reagują z jonami żelazowymi z
utworzeniem czerwono zabarwionego kompleksu, którego absorbancja
mierzona w 500 nm (450-500) jest proporcjonalna do ilości jonów
chlorkowych w próbce.
ODCZYNNIKI
R1
Niezhemolizowana surowica lub heparynizowane osocze.
Mocz lub CSF.
Chlorki są trwałe w próbce przez :
9 1 tydzień w temperaturze pokojowej lub w 2-8°C.
ZASADA (1) (4) (5)
Hg(SCN)2 + 2Cl
POBIERANIE I OPRACOWANIE PRÓBEK (2) (6)
ODCZYNNIK Z TIOCYJANIANEM
INTERFERENCJE (3)
Bilirubina :
Brak istotnej interferencji do 100 µmol/L (6.0 mg/dl).
Jeśli powyżej, delikatne zawyżenie wyników, które nie
przekracza 2 mmol/L w zakresie od 100 do 375 µmol/L
bilirubiny.
Opalescencja - zawyżenie o ok. 4 to 8 mmol/L.
Zmętnienie :
Próbka mleczna - wyniki będą odpowiedni zawyżone.
Dla zmniejszenia tej interferencji należy wykonać próbę
ślepą surowicy lub analizę bichromatyczną (patrz §
PROCEDURA MANUALNA)
Hemoglobina : Zawyżenie o ok. 5 mmol/L dla stężenia hemoglobiny w
próbce 205 µmol/L (330 mg/dl).
Kwas askorbinowy : Nie ma istotnych interferencji do 10 mg/dl witaminy
C w próbce.
Obszerniejszy przegląd czynników wpływających na to oznaczenie
znajduje się w publikacji Young D.S.
Azotan żelazowy
22.2
mmol/L
Chlorek rtęciowy
0.55
mmol/L
Tiocyjanian żelazowy
1.33
mmol/L
Kwas azotowy
30
mmol/L
NIZBĘDNE NIE DOSTARCZONE MATERIAŁY
Surfaktant
1
mL/L
1. Podstawowe wyposażenie analitycznego laboratorium medycznego.
2. Prawidłowe i patologiczne surowice kontrolne.
R2
WZORZEC
Chlorki 100 mmol/L
ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Odczynniki BIOLABO są przeznaczone do profesjonalnego użytku in vitro.
• Używać odpowiedniej ochrony (fartuch, rękawiczki, okulary).
• Nie pipetować ustami.
• Zanieczyszczoną skórę czy zanieczyszczone oczy przemyć starannie dużą
ilością wody i zasięgnąć porady lekarza.
• Pozostałe informacje są zawarte w Karcie Charakterystyki Substancji
Niebezpiecznej.
• Odpady : Przestrzegać przepisów obowiązujących w danym kraju.
Wszystkie próbki powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne –
zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej stosować odpowiednie środki
ostrożności. Przestrzegać przepisów obowiązujących w kraju.
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKÓW
Odczynniki są gotowe do użycia.
KALIBRACJA
• Wzorzec (R2) zawarty w zestawie lub BIOLABO-Multikalibrator NR
KAT R95015.
• lub jakikolwiek kalibrator spójny z metodą/materiałem referencyjnym.
Częstotliwość kalibracji zależy od prawidłowości funkcjonowania aparatu
i przechowywania odczynnika.
Zaleca się kalibrację w następujących przypadkach :
1. Przy zmianie serii odczynnika.
2. Po serwisowaniu aparatu.
3. Jeśli wartości kontroli są poza zakresem, nawet po użyciu nowej
świeżej butelki surowicy.
Wersja AT 80005 22 02 2005
KONTROLA JAKOŚCI
LINIOWOŚĆ
•
BIOLABO EXATROL-N (wartości prawidłowe), NR KAT. R95010.
•
BIOLABO EXATROL-P (wartości patologiczne), NR KAT. R95011.
•
Inne surowice kontrolne odwołujące się do tej samej metody.
•
Zewnętrzny program kontroli jakości.
Zaleca się kontrolowanie w następujących przypadkach :
•
Minimum raz na serię.
•
Minimum raz w ciągu 24 godzin.
•
Przy zmianie butelki odczynnika.
•
Po serwisowaniu aparatu.
Jeśli kontrola jest poza zakresem, podjąć następujące działania :
1.
Powtórzyć test z tą samą kontrolą.
2.
Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, przygotować świeżą surowicę
kontrolną i powtórzyć test.
3.
Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, użyć nową butelkę świeżego
kalibratora i powtórzyć test.
4.
Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, wykalibrować nową butelkę
odczynnika.
5.
Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, skontaktować się z działem
technicznym BIOLABO lub lokalnym dystrybutorem.
Reakcja jest liniowa w zakresie od 70 do 140 mmol/L. Maksymalna
różnica wynosi + 3% wartości teoretycznej. Dla wartości niższej niż 70
mEq/L, nalęzy wyznaczyć krzywą kalibracyjną (z roztworami chlorków
20, 40, 60 mEq/L) lub zwiększyć objętość próbki. Powyżej 140 mmol/L rozcieńczyć próbkę wodą demineralizowaną wolną od chlorków
i
powtórzyć oznaczenie biorąc pod uwagę współczynnik rozcieńczenia.
Zakres liniowości zależy od stosunku próbka/odczynnik.
PROCEDURA MANUALNA
Doprowadzić odczynnik i próbki do temperatury pokojowej.
Odpipetować do prawidłowo
oznakowanych probówek
testowych :
WARTOŚCI OCZEKIWANE (2)
Wzorzec
Badana
Odczynnik
1 mL
1 mL
1 mL
Woda
demineralizowaną
10 µL
10 µL
Wzorzec
W surowicy lub osoczu
10 µL
Próbkę
Chlorki
mEq/L
[mmol/L]
Pępowinowa
96-104
[96-104]
Wcześniak
95-110
[95-110]
0 do 30 dni
98-113
[98-113]
do 90 roku
98-107(108)
[98-107(108)]
> 90 lat
98-111
[98-111]
Dobrze wymieszać. Pozostawić na 5 minut w temperaturze pokojowej.
Odczytać absorbancję w 500 nm (450-500) wobec próby ślepej odczynnikowej.
Chronione od światła zabarwienie jest trwałe przez 30 minut.
Uwagi :
9 Aplikacje na automatyczne analizatory są dostępne na życzenie.
Prosimy o kontakt z działem technicznym BIOLABO.
9 Oznaczenie ślepej próbki może być wykonane przez zastąpienie
odczynnika tiocyjanianowego roztworem soli, pomiar absorbancji w
500 nm wobec roztworu soli i następnie odjęcie absorbancji próby
ślepej próbki od zmierzonej absorbancji dla próbki badanej.
9 Bichromatyczna analiza w zakresie od 500 do 600 nm pozwala na
obniżenie o 50% interferencji związanej ze zmętnieniem
z
jednoczesnym obniżeniem czułości o 10%.
9 Czułość jest lepsza w 450-460 nm, ale reakcja jest bardziej swoista w
zakresie od 480 do 500 nm.
W moczu 24 godzinnym
Chloki
Ślepa
mEq/L
[mmol/L]
Newborn
2-10
[2-10]
Dzieci < 6 lat
15-40
[15-40]
6-10 lat, M
36-110
[36-110]
6-10 lat, K
18-74
[18-74]
OBLICZENIA
10-14 lat, M
64-176
[64-176]]
Oblicz wynik następująco :
10-14 lat, K
36-173
[36-173]
Dorośli
110-250
[110-250]
> 60 lat
95-195
[95-195]
Wynik =
Abs (pr. badanej)
Abs (wzorca)
x stężenie wzorca
PIŚMIENNICTWO
(1)
W CSF
Chlorki
mEq/L
Dzieci
110-130
[110-130]
Dorośli
118-132
[118-132]
(2)
(3)
[mmol/L]
(4)
(5)
Każde laboratorium powinno wyznaczyć swoje zakresy wartości prawidłowych dla
populacji, dla której świadczy usługi laboratoryjne.
Wyprodukowano we Francji
CHARAKTERYSRTYKA DZIAŁANIA
Wewnątrz serii Poziom
n = 20
niski
ŚREDNIA
85.1
Poziom
wysoki
Między seriami
n = 20
Poziom
niski
Poziom
wysoki
136.3
ŚREDNIA
84.6
133.4
mmol/L
(6)
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 1063-1064, 1104.
Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 124-127.
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995) p.
3-137 à 3-141
ZALL D.M., FISHER D., GARNER D.O., ANAL. CHEM. 28, 1665 (1956).
FLORENCE T.M. AND Y.J. FARRAR : SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF
CHLORIDE AT THE PARTSPER-BILLION LEVEL BY THE MERCURY (II) THIOCYANATE
METHOD, ANAL. CHIM. ACTA., 54 : 373-377 (1971).
HENRY R. J.(ED), CLINICAL CHEMISTRY: Principles and technics(2nd éd.),
Harper and Row, p.718-719 (1974).
mmol/L
SD mmol/L
0.51
0.94
SD mmol/L
0.67
1.95
CV %
0.60
0.69
CV %
0.79
1.5
Granica wykrywalności :
ok. 1.4 mmol/L
Czułość dla 100 mmol/L : ok. 0.350 Abs w 500 nm.
Bdanie porównawcze z innym komercyjnie dostępnym odczynnikiem:
y = 1.0391 x – 2.9153
r = 0.9944
Wersja : AT 80005 22 02 2005