triglicerydy - "Aqua-Med" ZPAM – KOLASA sp.j

TRIGLICERYDY
ODCZYNNIKI
BIOLABO
Metoda GPO
Odczynnik do ilościowego oznaczania triglicerydów w ludzkiej surowicy lub
osoczu.
BIOLABO
PRODUCENT :
WYŁĄCZNY DYSTRYBUTOR :
BIOLABO SA,
AQUA-MED ZPAM – KOLASA sp. j.
02160, Maizy, France
ul. Wólczańska 212,
90-531 Łódź
NR KAT 80019 : 2 x 50 ml
NR KAT 87319 : 10 x 100 ml
AQUA-MED
Tel. : 0-42 636 38 02, 636 37 51
Fax : 0-42 637 02 96
IVD DO DIAGNOSTYKI IN VITRO
ZNACZENIE KLINICZNE (1)
ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Oznaczanie triglicerydów jest używane w diagnostyce i leczeniu
pacjentów z hiperlipoproteinemią. Podwyższone poziomy są
obserwowane w pierwotnych i wtórnych chorobach metabolizmu lipidów
takich, jak : cukrzyca, inne zaburzenia endokrynologiczne, choroby
wątroby, ostre i przewlekłe zapalenia trzustki, zespół nerczycowy.
Podwyższenie stężenia triglicerydów zostało zidentyfikowane jako
czynnik ryzyka chorób miażdżcowych. Wzrost stężenia triglicerydów jest
odpowiedzialny za zmętnienie surowicy.
Podanie
estrogenów
i
kortykosterydów
może
nasilać
hipertriglicerydemię.
Odczynniki BIOLABO są przeznaczone do profesjonalnego użytku w
diagnostyce in vitro.
Stosować odpowiednią ochronę (fartuch, rękawiczki, okulary). Nie
pipetować ustami. W przypadku kontaktu ze skórą czy oczami starannie
spłukać dużą ilością wody i zasięgnąć porady lekarza. Odczynniki
zawierają azydek sodowy (stężenie < 0.1%), który może reagować z
miedzią i ołowiem kanalizacji. Wylewając spłukać dużą ilością wody.
Pozostałe informacje są zawarte w Karcie Charakterystyki Substancji
Niebezpiecznej.
Odpady : Przestrzegać przepisów obowiązujących w kraju.
Wszystkie próbki powinny być traktowane jako potencjalnie zakaźne –
należy zastosować odpowiednie środki ostrożności zgodnie z zasadami
dobrej praktyki laboratoryjnej. Przestrzegać przepisów obwiązujących w
kraju.
ZASADA (4) (5)
Metoda Fossati jest związana z reakcją Trindera:
Trigliceridy
Glicerol + ATP
Lipaza
Glicerol + wolne kwasy tłuszczowe
GK
Glicero-3 fosforan
GPO
Glicero-3-fosforan + O2
H2O2 + 4-Chlorofenol
+ PAP
+ ADP
Fosforan dihydroksyacetonu + H2O2
POD
Chinonoimina (różowa) + H2O
Absorbancja barwnego kompleksu (chinonoiminy) proporcjonalna do
stężenia triglicerydów w próbce jest mierzona w 500 nm.
ODCZYNNIKI
R1
BUFOR
PIPES
Chlorek magnezowy
4- Chlorofenol
Konserwant
R2
100 mmol/l
9.8 mmol/l
3.5 mmol/l
ENZYMY
Lipaza
> 1000
Peroksydaza (POD)
> 1700
Oksydaza glicero-3-fosforanowa (GPO)> 3000
Kinaza glycerolowa (GK)
> 660
4-Aminoantypiryna (PAP)
0.5
Trifosforan sodowy adenozyny (ATP)
1.3
R3
IU/l
IU/l
IU/l
IU/l
mmol/l
mmol/l
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKÓW
Dodać szybko zawartość butelki R2 (enzymy) do butelki R1 (bufor).
Wymieszać delikatnie i poczekać przed użyciem do całkowitego
rozpuszczenia się odczynnika (ok. 2 min.).
Butelka R2 : Użyć nieostrego narzędzia dla usunięcia aluminiowego
kapsla.
TRWAŁOŚĆ I PRZECHOWYWANIE
Przechowywać w 2-8°C i chronić przed dostępem światła.
• Nie otwarte: Odczynniki są trwałe do daty ważności umieszczonej na
etykiecie.
• Po rozpuszczeniu: Odczynnik roboczy jest trwały minimum 1 rok,
jeśli nie uległ kontaminacji.
Trwałość wzorca (R3): Kilka tygodni (przenieść potrzebną ilość,
zamknąć butelkę i przechowywać w 2-8°C).
Wyrzucić odczynnik, jeśli zmętnieje lub jeśli absorbancja w 500 nm >
0.200.
Zestaw może być transportowany minimum 1 tydzień
w temp.
pokojowej.
POBIERANIE PRÓBKI I PRZYGOTOWANIE (2)
Surowica lub osocze (heparyna lub EDTA) na czczo > 12 godzin.
Oddzielić od krwinek w ciągu 2 godzin.
Nie używać szczawianów, fluorków lub cytrynianów.
Triglicerydy są trwałe przez
• 5-7 dni w 2-8°C,
• przez 3 miesiące w –20°C,
• przez wiele lat w –70°C. Unikać rozmrażania i ponownego
zamrażania.
Unikać ponownego zamrażania i rozmrażania.
WZORZEC
Glicerol
2.28 mmol/l
Ekwiwalent trioleiny lub triglicerydów 200 mg/dl (2.28 mmol/l)
Wersja: AT 80019 22 12 2005
INTERFERENCJE (1) (2) (3)
LINIOWOŚĆ
Kwas askorbinowy : Nie interferuje istotnie do 2.5 mg/dl. Powyżej
obniża wyniki.
Hemoglobina : Nie interferuje istotnie do 1,93 g/dL (300 µmol/L).
Nie interferuje istotnie do 8 mg/dl (137 µmol/L).
Bilirubina :
Powyżej obniża wyniki.
Wolny glicerol : Endogenny glicerol podwyższa wyniki średnio o 10
mg/dl (0.11 mmol/l).
Obszerniejszy przegląd czynników wpływających na to oznaczenia,
znajduje się w publikacji Young D.S.
Liniowość do minimum 700 mg/dl (7.9 mmol/l). Jeśli powyżej,
rozcieńczyć próbkę roztworem soli i powtórzyć oznaczenie z
uwzględnieniem współczynnika rozcieńczenia. Zakres liniowości zależy
od stosunku próbka/odczynnik.
PROCEDURA MANUALNA
Pozwolić aby odczynniki i próbki osiągnęły temperaturę pokojową.
Opipetować do probówek
testowych:
NIZBĘDNE NIE DOSTARCZONE MATERIAŁY
1.
Podstawowe wyposażenie medycznego laboratorium
analitycznego.
2. Normalne i patologiczne surowice kontrolne.
Ślepa
Wzorzec
Badana
Odczynnik
1 ml
1 ml
1 ml
Wodę demineral.
10 µl
10 µl
Wzorzec
10 µl
Próbkę
KALIBRACJA
•
•
Wzorzec (R3) dostarczony w zestawie BIOLABO-Multikalibrator NR
KAT. 95015.
lub jakikolwiek kalibrator spójny pomiarowo z metodą referencyjną
lub materiałem referencyjnym.
Częstotliwość kalibracji
zależy od prawidłowości funkcjonowania
przyrządu i trwałości się odczynnika.
Zaleca się kalibrację w następujących przypadkach :
1. Kiedy zmienia się butelkę odczynnika.
2. Po serwisowaniu aparatu.
3. Jeśli wyniki kontroli są poza zakresem, nawet po użyciu nowej
butelki odczynnika
Wymieszać. Pozostawić na 5 min. w 37°C lub na 10 min. w temperaturze
pokojowej. Odczytać absorbancję w 500 nm (480-520) wobec ślepej
odczynnikowej.
Barwa jest trwała 1 godzinę.
Uwaga: Procedury dla automatycznych analizatorów są dostępne na
życzenie. Skontaktować się z działem technicznym BIOLABO.
OBLICZENIA
Obliczyć wynik wg poniższego wzoru :
Wynik =
Abs (badanej)
Abs (wzorca)
x Stężenie wzorca
PIŚMIENNICTWO
KONTROLA JAKOŚCI
•
BIOLABO EXATROL-N (wartości prawidłowe), NR KAT. 95010.
•
BIOLABO EXATROL-P (wartości patologiczne), NR KAT. 95011.
•
Inne surowice kontrolne odwołujące się do tej same metody.
•
Program zewnętrznej kontroli jakości.
Zaleca się kontrolowanie w następujących przypadkach :
•
Raz na serię.
•
Raz w ciągu 24 godzin.
•
Przy zmianie butelki odczynnika.
•
Po serwisowaniu aparatu.
Jeśli kontrola jest poza zakresem podjąć następujące działania :
1. Powtórzyć test z ta samą kontrolą.
2. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, przygotować świeżą
surowicę kontrolną i powtórzyć test.
3. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, użyć nową butelkę
świeżego kalibratora i powtórzyć test.
4. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, wykalibrować nową
butelkę odczynnika.
5. Jeśli kontrola jest nadal poza zakresem, skontaktować z działem
technicznym BIOLABO lub lokalnym dystrybutorem.
WARTOŚCI OCZEKIWANE (6)
Triglicerydy
Zakres referencyjny
mg/dl
[ mmol/l ]
35 - 160
[ 0.40 - 1.82 ]
Każde laboratorium powinno wyznaczyć swoje zakresy wartości
prawidłowych dla populacji, dla której świadczy usługi laboratoryjne.
CHARAKTERYSTYKA DZIAŁANIA
Wewnątrz
serii :
N = 30
Poziom
normalny :
Poziom
wysoki :
Między
seriami
N = 33
Średnia mg/dl
108
221
Średnia mg/dl
80
SD mg/dl
1
2
SD mg/dl
1
2.1
CV %
1.00
1.00
CV %
1.20
1.00
Granica wykrywalności : ok. 10 mg/dl
Czułość dla 100 mg/dl : Abs. 0.125 w 500 nm
Porównanie z komercyjnie dostępnym odczynnikiem:
y = 1.0182 x – 3.02
r = 0.9958
Poziom
Poziom
normalny: wysoki :
223
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 809-857.
Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 610-611.
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995) p.
3-573 to 3-589
Fossati P., Prencipe L., Clin. Chem. (1982), 28, p.2077-2080.
Trinder P. Ann. Clin. Biochem. (1969), 6, p.29-27.
TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 2cde Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1994)p. 1030-1058 et p. 1073-1080.
Wyprodukowano we Francji
Wersja: AT 80019 22 12 2005