Informacja o odczynnikach Analizatory, w których mogą być

0020739014322COINV5.0
T-UP
T-Uptake
Hormony
Informacja o odczynnikach
20739014 322
20762059 322
12149435 122
12149435 160
12149443 122
12149443 160
20764337 322
T-Uptake (200 testów)
ID systemowe 07 3901 4
COBAS FP (4 × 1.0 mL)
T-Uptake Calibrators A-D
Precinorm U plus (10 × 3 mL)
Precinorm U plus (10 x 3 mL, dla USA)
Precipath U plus (10 × 3 mL)
Precipath U plus (10 x 3 mL, dla USA)
COBAS INTEGRA Cleaner Cassette (150 testów)
ID systemowe 07 6205 9
USA # 46205
ID systemowe 07 7999 7
ID systemowe 07 7999 7
ID systemowe 07 8000 6
ID systemowe 07 8000 6
ID systemowe 07 6433 7
Polski
Informacja o aplikacjach
Test T-UP, test ID 0-901.
Zastosowanie
Test in vitro do ilościowych oznaczeń wychwytu tyroksyny w surowicy i
heparynizowanym osoczu w systemach COBAS INTEGRA.
Podsumowanie
Hormony tarczycy: tyroksyna (T4) i trójjodotyronina (T3), są przenoszone w
surowicy związane z białkami wiążącymi tyroksynę, głównie z globuliną
wiążącą tyroksynę (TBG).1,2 Zazwyczaj jedynie niewielka frakcja (0.03 % z
T4 i 0.3 % z T3) pozostaje w postaci niezwiązanej.1,3,4 Przyjmuje się, że
hormony tarczycy we krwi w postaci wolnej lub niezwiązanej stanowią
frakcję fizjologicznie aktywną.3,4,5 Zmiany stężenia białek wiążących takich
jak TBG mają wpływ na poziom wolnych hormonów, co z kolei powoduje
hamowanie lub stymulację wytwarzania hormonów.5,6 Metoda T‑uptake
służy do oznaczania zdolności białek w surowicy do wiązania
skoniugowanego z fluoresceiną analogu T4. W połączeniu z oznaczeniem
całkowitej T4 w surowicy, oznaczenie wychwytu tyroksyny pozwala na
wyliczenie wskaźnika wolnej tyroksyny (FT4I), oceny wolnych hormonów
tarczycy.7,8,9 Jest to szczególnie istotne w pewnych stanach klinicznych
gdzie stężenie zarówno całkowitej T4 jak i T‑uptake mogą się różnić od
wartości prawidłowych. Stanami takimi są między innymi ciąża, terapia
estrogenowa, ostre wirusowe oraz przewlekłe zapalenie wątroby, marskość
wątroby lub schorzenia wrodzone.7,10,11,12,13 Wyniki uzyskane metodą
COBAS INTEGRA T‑Uptake wyliczane są w porównaniu do roztworów
kalibratora zawierających znane ilości białek wiążących analog T4.
Jednostki kalibratora zdefiniowano od 0 do 2.0, przy czym przeciętny wynik
dla eutyreozy wynosi około 1.0. Przy pomocy kasety COBAS INTEGRA
T‑Uptake oznacza się bezpośrednio zdolność wiązania hormonu tarczycy.
Oznaczenie to różni się od innych metod badania wychwytu tyroksyny, w
których do surowicy dodawana jest stała ilość znacznika analogu T3 lub T4
a następnie oznaczana ilościowo frakcja niezwiązana. Z tego powodu
jednostki COBAS INTEGRA T‑uptake stanowią odwrotność proporcji
wyniku w % wychwytu podawanego w oznaczeniach tymi metodami.
Zasada pomiaru
Polaryzacja fluorescencji.
W analizatorach COBAS INTEGRA oznaczenia COBAS INTEGRA
T‑Uptake w surowicy wykonywane są przy zastosowaniu zasad polaryzacji
fluorescencji. Gdy cząsteczka fluoryzująca albo fluorofor ulegnie
naświetleniu odpowiednią długością fali (długość fali wzbudzenia), część
światła ulega absorpcji. W ciągu kilku nanosekund zaabsorbowana energia
jest emitowana, jednak przy większej długości fali (długość fali emisji). O
spolaryzowaniu, bądź nie spolaryzowaniu wyemitowanego światła decyduje
to, w jakim stopniu fluorofor może swobodnie obracać się w roztworze.
Mała cząsteczka, taka jak fluoresceina, może rotować na tyle szybko, że
zanim pozbędzie się nadmiaru energii, zdąży się wielokrotnie obrócić, w
wyniku czego następuje depolaryzacja emitowanego światła. Natomiast
fluoryzująca makrocząsteczka, taka jak np. białko znakowane fluoresceiną,
obraca się znacznie wolniej. Tak więc w okresie pomiędzy wzbudzeniem a
emisją, ruch makrocząsteczki jest bardzo nieznaczny (praktycznie można
przyjąć, że cząsteczka jest nieruchoma), a emitowane światło będzie
spolaryzowane.14
Polaryzacja fluorescencyjna jest wtórną funkcją stężenia hormonu i
umożliwia ilościowe oznaczanie stężenia nienasyconej globuliny wiążącej
tyroksynę (TBG) w surowicy w celu oceny czynności tarczycy.
2016-03, V 5.0 Polski
Analizatory, w których mogą być używane
odczynniki cobas c pack
COBAS INTEGRA 400 plus
COBAS INTEGRA 800
Odczynniki - roztwory robocze
Uwaga
Należy stosować jedynie produkty opisane w niniejszej ulotce. Stosowanie
innych odczynników, kalibratorów lub wzorców może dawać błędne wyniki.
R1
Odczynnik z buforem barbitalowym: Bufor, pH 8.5; stabilizatory;
konserwant.
SR
Odczynnik ze znacznikiem: T4 znakowana fluoresceiną w buforze,
pH 8.5; stabilizatory; konserwant.
R1 jest w pozycji B, a SR jest w pozycji C.
Zalecenia i środki ostrożności
Należy przestrzegać wszelkich zaleceń oraz środków ostrożności
zawartych w rozdziale 1, "Wstęp".
Dla USA: Wyłącznie na osobne zalecenie
Postępowanie z odczynnikami
Gotowy do użycia
Przechowywanie i trwałość
W temp. 2‑8 °C
Do daty ważności na
etykiecie cobas c pack
System COBAS INTEGRA 400 plus
W analizatorze w temperaturze 10‑15 °C
12 tygodnie
System COBAS INTEGRA 800
W analizatorze w temp. 8 ℃
26 tygodnie
Nie używać odczynników po upływie daty ważności cobas c pack.
Brak właściwego zakresu wyników przy oznaczeniach materiału
kontrolnego może wskazywać na rozkład odczynników.
Pobieranie i przygotowanie materiału
W celu pobrania i przygotowania materiału należy stosować jedynie
przeznaczone do tego probówki lub pojemniki.
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów
biologicznych wymienionych poniżej.
Surowica: Surowicę należy pobrać do standardowych probówek.
Materiałem z wyboru do badań jest surowica.
Osocze: Osocze krwi pobranej na heparynę litową. Nie stosować osocza
krwi pobranej na EDTA, fluorki lub szczawiany.
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału dostępnych na rynku w czasie wykonywania
oznaczeń. Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich
producentów. Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych
producentów mogą zawierać różniące się materiały, co w pewnych
przypadkach może mieć wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku
stosowania probówek pierwotnych (systemów pobierania krwi) należy ściśle
przestrzegać zaleceń ich producenta.
Nie należy wielokrotnie zamrażać i rozmrażać próbek. Probówki z
rozmrożonymi próbkami należy przed oznaczeniem wymieszać poprzez
kilkukrotne odwrócenie do góry dnem.
Stabilność:
1/3
8 godz. w temperaturze 15-25 °C
T-UP
0020739014322COINV5.0
T-UP
T-Uptake
Hormony
do 48 godzin w temperaturze 2-8 °C
przez dłuższy okres w temp. (-20) °C lub niższej.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem lub
obecnością strątów.
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach.
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z poniższą instrukcją obsługi dla operatora,
uwzględniając typ aparatu.
Aplikacja dla surowicy i osocza
Definicja testu COBAS INTEGRA 400 plus
Rodzaj pomiaru
FP
Rodzaj reakcji
Długość fali
R1-S-SR
wzbudzenia
485 nm
emisji
515 nm
Odczyt próby ślepej/testu
29/45
Jednostka
Jednostka
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik (H2O)
R1
140 µL
10 µL
Próbka
3.5 µL
20 µL
SR
24 µL
10 µL
Objętość całkowita
207.5 µL
Definicja testu COBAS INTEGRA 800
Rodzaj pomiaru
FP
Rodzaj reakcji
R1-S-SR
Długość fali
wzbudzenia
485 nm
emisji
515 nm
Odczyt próby ślepej/testu
40/60
Jednostka
Jednostka
Parametry pipetowania
Rozcieńczalnik (H2O)
R1
140 µL
10 µL
Próbka
3.5 µL
20 µL
SR
24 µL
10 µL
Objętość całkowita
207.5 µL
Kalibracja
Kalibrator
4 COBAS FP T‑Uptake Calibrators
0, 0.6, 1.4, 2.0 Jednostki
Tryb kalibracji
Regresja liniowa
Powtórzenie kalibracji
Zalecana w duplikacie
Odchylenie dolne/górne
<10 % dla ≥ 0.6 Jednostki
Częstotliwość kalibracji
Systemy COBAS INTEGRA 400 plus:
Każda seria i co 20 tygodni jak również
zgodnie z procedurami kontroli jakości
Systemy COBAS INTEGRA 800:
Każda seria i co 26 tygodni oraz zgodnie z
procedurami kontroli jakości
T-UP
Krzywa kalibracji powinna być wyznaczona przy użyciu kalibratora
COBAS FP T‑Uptake Calibrators. Kalibratory należy umieścić w statywie
CAL/QC według gradientu stężeń: od najwyższego (D) do najniższego (A).
Krzywa kalibracji zapisywana jest w pamięci analizatora COBAS INTEGRA
i wywoływana w trakcie późniejszych analiz.
Kontrola jakości
Kontrola jakości
Precinorm U plus
Precipath U plus
Częstotliwość kontroli
Zalecana co 24 godz.
Sekwencja kontroli
Definiowana przez użytkownika
Kontrola po kalibracji
Zalecana
Uwaga
Pomiar kontroli powinien być wykonany w przeciągu 2 godzin od
umieszczenia ich w analizatorze.
Do kontroli należy używać materiałów wyszczególnionych w części
"Informacja o odczynnikach". Można stosować również inny odpowiedni
materiał kontrolny.
Częstotliwość i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane
do indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach. Wskazane jest, by każde
laboratorium opracowało procedury naprawcze, które należy wdrożyć, gdy
wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych znajdą się poza podanym
zakresem.
Procedury kontroli jakości należy stosować zgodnie z właściwymi
zaleceniami organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
Wyliczenie
Analizatory COBAS INTEGRA automatycznie obliczają stężenie
oznaczanej substancji dla każdej próbki. Więcej informacji zawarto w
rozdziale "Dane Analityczne" na stronie internetowej Online Help
(analizatory COBAS INTEGRA 400 plus/800).
Ograniczenia - substancje interferujące
System zaznaczy próbki, w których wynik oznaczenia jest wyższy od
najwyższego kalibratora. Nie rozcieńczać. Analizator zaznaczy również
próbki o wysokiej fluorescencji tła oraz próbki o wartościach polaryzacji
przewyższających kalibrator zerowy.
Kryterium: Odzysk w granicach ± 10 % wartości początkowej.
Żółtaczka:15 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika
I wynoszącego 33 dla przybliżonego stężenia związanej i niezwiązanej
bilirubiny (przeciętne stężenie bilirubiny związanej i niezwiązanej:
564 µmol/L lub 33.4 mg/dL).
Hemoliza:15 Brak istotnej interferencji do wartości wskaźnika H
wynoszącego 1000 (przybliżone stężenie hemoglobiny: 621 µmol/L lub
1000 mg/dL).
Lipemia:15 Brak istotnej interferencji do poziomu triglicerydów 5350 mg/dL.
W bardzo rzadkich przypadkach gammapatii, szczególnie typu IgM
(makroglobulinemia Waldenströma), wyniki mogą być niemiarodajne.16
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane z
uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz innych danych o
pacjencie.
WYMAGANA CZYNNOŚĆ
Programowanie specjalnego cyklu mycia: W odniesieniu do pewnych
kombinacji testów przeprowadzanych jednocześnie w analizatorach
COBAS INTEGRA obowiązkowe jest stosowanie specjalnych cykli mycia.
Dalsze instrukcje oraz najnowsza wersja Dodatkowych Cykli Mycia, zob.
ulotka metodyczna odczynnika CLEAN.
Tam, gdzie to konieczne, przed podaniem wyników testu należy
wprowadzić mający na celu uniknięcie efektu przeniesienia specjalny
program dodatkowego cyklu mycia.
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
System COBAS INTEGRA 400 plus:
0.02‑2.0 Jednostki
System COBAS INTEGRA 800:
0.01‑2.0 Jednostki
2/3
2016-03, V 5.0 Polski
0020739014322COINV5.0
T-UP
T-Uptake
Hormony
Dolna granica pomiarowa
Dolny zakres wykrywalności testu
System COBAS INTEGRA 400 plus:
0.02 Jednostki
System COBAS INTEGRA 800:
0.01 Jednostki
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe mierzalne stężenie
oznaczanej substancji, które można odróżnić od kalibratora zerowego przy
poziomie ufności wynoszącym 95 %.
Wartości oczekiwane
Na stężenie T‑uptake wpływ może mieć płeć, miejsce zamieszkania jak
również inne czynniki. Bardzo istotne jest, aby każde laboratorium ustaliło
własne zakresy prawidłowe.17
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić
poziom wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości
referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane wyznaczone przy użyciu analizatorów COBAS INTEGRA podano
poniżej. Wyniki uzyskane w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję oznaczono w oparciu o próbki materiału i próbki kontrolne zgodnie
z przyjętym protokołem wewnętrznym przy powtarzalności (n = 20) i
precyzji pośredniej (2 porcje w oznaczeniu, 2 oznaczenia na dzień, przez
20 dni). Otrzymano następujące wyniki.
Powtarzalność
Średnia
OS
WZ
Jednostka
%
III
0.7
0.01
0.9
I
0.8
0.01
1.0
Kontrola C (wysoka)
1.3
0.01
0.7
Precyzja pośrednia
Średnia
OS
WZ
Jednostka
%
6
Woeber KA. In: Ingbar SH, Braverman LE, eds. Werner’s The Thyroid:
A Fundamental and Clinical Text. 5th ed. New York, NY: JB Lippincott
Co 1986;502-508.
7 Travis JC. Clinical Radioimmunoassay: State-of-the-Art. Anaheim,
Calif: Scientific Newsletters Inc, Radioassay-Ligand Assay Publishers
1980;133.
8 Refetoff S, Larsen PR. In: DeGroot LJ, Besser GM, Cahill GF, et al,
eds. Endocrinology, 2nd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Co
1989;590-639.
9 Wilke TJ. Clin Chem 1986;32(4):585-592.
10 Bermudez F, Surks MI, Oppenheimer JH. J Clin Endocrinol Metab
1975;41:27-40.
11 Larsen PR. Metabolism 1972;21(11):1073-1092.
12 Szpunar WE, Stoffer SS, DiGiulio W. J Nucl Med 1987;28:1341-43.
13 Refetoff S, Larsen PR. In: DeGroot LJ, Besser GM, Cahill GF, et al,
eds. Endocrinology, 2nd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Co
1989;541-561.
14 Dandliker WB, Feigen GA. Quantification of the antigen-antibody
reaction by the polarization of fluorescence. Biochem Biophys Res
Comm 1961;5:299-304.
15 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470-475.
16 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
17 Jacobs DS, Kaster BL Jr, Demott WR, et al. Laboratory Test
Handbook. Stowe, 2nd ed. OH. Lexi-Compl. Mosby 1990;341.
W niniejszej ulotce metodycznej jako separatora dziesiętnego,
oddzielającego liczbę całkowitą od części dziesiętnych ułamka dziesiętnego
stosuje się zawsze kropkę. Separatorów oddzielających tysiące nie używa
się.
Symbole
Oprócz znaków zawartych w standardzie ISO 15223‑1, firma Roche
Diagnostics używa następujących symboli i znaków.
III
0.7
0.01
2.0
I
0.8
0.02
2.3
Zawartość zestawu
Kontrola C (wysoka)
1.3
0.02
1.6
Objętość po rekonstytucji lub wymieszaniu
Porównanie metod
Wartości wychwytu tyroksyny w surowicy ludzkiej oznaczone w analizatorze
COBAS INTEGRA 700 przy pomocy odczynnika COBAS INTEGRA
T‑Uptake porównano z wynikami otrzymanymi przy zastosowaniu innej
dostępnej na rynku metody FPIA.
Globalny handlowy numer identyfikacyjny
GTIN
Dodatki, usunięte fragmenty oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie.
© 2016, Roche Diagnostics
FPIA
Liczba próbek
Zakres wartości
Nachylenie
Przesunięcie
Współczynnik korelacji
203
min.
0.25 Jednostki
max.
≥ 2.0 Jednostki
0.903
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
Dystrybucka w USA:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN
US Customer Technical Support 1-800-428-2336
0.109 Jednostki
0.982
Literatura
1 Utiger RD. In: Felig P, Baxter JD, Broadus AE, et al. eds.
Endocrinology and Metabolism. 2nd ed. New York, NY: McGraw-Hill
1987;389-409.
2 Sutherland RL, Simpson-Morgan MW. J Endocrinol 1975;65:319-332.
3 Cavalieri RR In: Green WL, ed. The Thyroid. New York, NY: Elsevier
Science Publishing Co Inc 1987;107-155.
4 Gershengorn MC, Glinoer D, Robbins J. In: De Visscher. ed. The
Thyroid Gland. New York, NY: Raven Press 1980;81-121.
5 Schussler GC. In: Ingbar SH, Braverman LE, eds. Werner’s The
Thyroid: A Fundamental and Clinical Text. 5th ed.New York, NY: JB
Lippincott Co 1986;381-391.
2016-03, V 5.0 Polski
3/3
T-UP